在癌癥研究的征程中,每一項創(chuàng)新技術(shù)都是希望的曙光,TissueGrinder(TIGR)組織解離技術(shù)便是這樣一顆璀璨之星,正以其獨特的科技魅力重塑腫瘤研究格局。
傳統(tǒng)困境與TIGR的誕生背景
癌癥研究始終致力于解開腫瘤組織的復(fù)雜謎題,探尋有效的治療路徑。然而,傳統(tǒng)的外植物法在獲取單細(xì)胞懸液時困難重重。其漫長且繁瑣的體外培養(yǎng)過程,猶如一道難以逾越的鴻溝,嚴(yán)重阻礙了對腫瘤細(xì)胞快速、精準(zhǔn)分析的進(jìn)程。在此背景下,TIGR技術(shù)應(yīng)運而生,猶如一位破局者,志在突破傳統(tǒng)局限,實現(xiàn)從實體瘤中快速、無損地解離細(xì)胞,為科研人員提供高質(zhì)量單細(xì)胞懸液,開啟癌癥研究的新征程。
TIGR技術(shù)的卓越特性剖析
獨特的機械解離原理:TIGR 技術(shù)在組織解離方面優(yōu)勢顯著。其獨特機械解離原理,運用精心設(shè)計的機械力處理實體瘤組織,相較于化學(xué)方法或者酶解法,巧妙避開化學(xué)試劑對細(xì)胞的潛在損傷與性質(zhì)改變風(fēng)險,如同給細(xì)胞穿上了一層“防護鎧甲”,有力維持細(xì)胞原始狀態(tài),為后續(xù)研究提供最真實的細(xì)胞樣本。
最小壓力保障細(xì)胞活性:在解離中,TIGR 施加極小壓力,有效防止細(xì)胞凋亡,保障細(xì)胞活性,這對深入研究細(xì)胞生物學(xué)特性、基因表達(dá)及細(xì)胞間相互作用至關(guān)重要,避免了細(xì)胞凋亡釋放干擾因子影響研究準(zhǔn)確性。
精準(zhǔn)保留細(xì)胞身份特征:同時,TIGR 精準(zhǔn)保留細(xì)胞身份特征,不破壞細(xì)胞類型與相關(guān)標(biāo)記,這使得單細(xì)胞懸液中的各類細(xì)胞。無論是腫瘤細(xì)胞還是免疫細(xì)胞等,都能牢牢持有自己的“身份標(biāo)簽”,為科研人員區(qū)分和研究不同細(xì)胞類型創(chuàng)造條件,有助于挖掘腫瘤微環(huán)境中細(xì)胞群體的分布與功能等,揭示腫瘤機制。
無損解離的優(yōu)勢:其無損解離能力突出,能減少細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能破壞,這一技術(shù)的優(yōu)勢在于其精細(xì)的操作能夠在不損害細(xì)胞完整性的前體下實現(xiàn)高效分離,確保后續(xù)實驗的準(zhǔn)確可靠。
實驗驗證突顯優(yōu)勢之處
為檢驗TIGR技術(shù)的性能,科研團隊精心設(shè)計實驗,將其與傳統(tǒng)外植物法進(jìn)行對比。對比的結(jié)果顯示:外植物法在生成單細(xì)胞懸液時,進(jìn)展緩慢耗時很久才能觀察到組織或細(xì)胞的變化。而TIGR則能在較短時間內(nèi)高效完成細(xì)胞分離任務(wù)。
圖 1. 采用組織研磨器(TG)和外植體法處理的三種不同腫瘤組織之間的對比。展示了肉瘤、胰腺癌以及肛管癌腫瘤樣本分別經(jīng)組織研磨器和外植體法處理后,在處理后的第 8 天、第 20 天和第 47 天的明場圖像。這些圖像是使用 4 倍蔡司物鏡(編號為 LDA-Plan421231-991)拍攝的。白色標(biāo)尺代表 200 微米。
此外,研究人員對經(jīng)TIGR處理的細(xì)胞進(jìn)行了全面檢測,涵蓋細(xì)胞活力、凋亡情況以及細(xì)胞類型和標(biāo)記的完整性等方面。結(jié)果是:經(jīng)TIGR處理的細(xì)胞無凋亡現(xiàn)象,高活力,細(xì)胞類型和標(biāo)記完整無損。這些結(jié)果充分證實了TIGR技術(shù)在制備高質(zhì)量單細(xì)胞懸液方面的可靠性和有效性,為其在癌癥研究及其他相關(guān)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用提供了有力的數(shù)據(jù)支撐,讓科研人員在研究道路上更有信心。
圖 2. 細(xì)胞在組織研磨器 (TG) 處理過程中所承受的機械應(yīng)力并不會導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。對取自兩名不同供體(編號分別為MaPac192和MaPaC194)的胰腺癌組織樣本經(jīng)組織研磨器處理后所獲得細(xì)胞中分離出的總蛋白進(jìn)行了蛋白質(zhì)免疫印跡分析。在組織處理后即刻、24 小時以及 48 小時收集細(xì)胞,對聚 ADP 核糖聚合酶(裂解型聚 ADP 核糖聚合酶)、半胱天冬酶 3 以及裂解型半胱天冬酶 3 的表達(dá)情況進(jìn)行了研究。每條泳道上樣 20 微克總蛋白,并通過 β- 肌動蛋白來確認(rèn)蛋白上樣量相等。
廣闊應(yīng)用前景與深遠(yuǎn)意義
助力癌癥研究邁向精準(zhǔn)化
TIGR 技術(shù)是癌癥研究的得力工具,可獲取高質(zhì)量單細(xì)胞懸液,助力剖析腫瘤細(xì)胞異質(zhì)性,為精準(zhǔn)診斷與個性化治療帶來希望,如探究腫瘤干細(xì)胞特性等
推動多領(lǐng)域研究創(chuàng)新發(fā)展
其影響還波及發(fā)育生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)等多領(lǐng)域,能追溯生命起源、解密神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)。作為創(chuàng)新的組織解離技術(shù),TIGR 在實體瘤單細(xì)胞懸液制備上優(yōu)勢顯著,有望為科研與臨床應(yīng)用助力,為人類健康添磚加瓦,開啟癌癥研究新篇。