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哺乳動物表達常用的細胞系簡介

瀏覽次數(shù):1155 發(fā)布日期:2024-3-28  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
        在哺乳動物細胞表達系統(tǒng)中,受體細胞是用于表達外源基因或蛋白質(zhì)的宿主細胞。哺乳動物細胞在重組蛋白的生產(chǎn)中起著至關重要的作用,并且選擇哺乳動物細胞是綜合有效表達外源基因、支持適當?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊和翻譯后修飾以及提供高蛋白質(zhì)產(chǎn)量的能力等因素。以下是哺乳系統(tǒng)表達中使用的一些常見哺乳動物細胞及其各自的特征:
 
1.中國倉鼠卵巢(CHO)細胞:
 
特性:CHO細胞是最廣泛用于蛋白質(zhì)表達的哺乳動物細胞系之一,來源于中國倉鼠(Cricetulus griseus)的卵巢,具有高轉(zhuǎn)染效率、強大的生長特性和進行復雜翻譯后修飾的能力。
 
優(yōu)點:CHO細胞蛋白表達通過適當?shù)恼郫B、糖基化和分泌產(chǎn)生高水平的重組蛋白,CHO細胞適用于瞬時和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法,并與各種表達載體和培養(yǎng)條件兼容。
 
應用:CHO細胞通常用于CHO細胞蛋白表達、生產(chǎn)單克隆抗體等。
 
2.人胚胎腎(HEK)293細胞:
 
特點:HEK 293細胞來源于人胚胎腎組織,轉(zhuǎn)染效率高,培養(yǎng)生長快,并且在生產(chǎn)重組蛋白方面是有效的,由于它們能夠在短時間內(nèi)產(chǎn)生高水平的重組蛋白,因此被廣泛用于瞬時轉(zhuǎn)染實驗。
 
優(yōu)點:HEK 293細胞表達蛋白具備人類來源的優(yōu)勢,可通過HEK 293細胞生產(chǎn)具有翻譯后修飾的重組蛋白,適合大規(guī)模生產(chǎn)蛋白質(zhì),并且可以容易地適應懸浮培養(yǎng)用于基于生物反應器的生產(chǎn)。這些細胞具有生長快、轉(zhuǎn)染效率高、能夠進行適當?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊和翻譯后修飾等優(yōu)點。
 
應用:HEK 293細胞表達蛋白、病毒載體和病毒疫苗,以及蛋白質(zhì)定位和相互作用研究,HEK293細胞通常用于研究,包括蛋白質(zhì)表征、功能研究和用于基因治療應用的病毒載體的生產(chǎn)。
 
3.小倉鼠腎臟(BHK)細胞:
 
特征:BHK細胞來源于幼倉鼠(Mesocricetus auratus)的腎組織,通常用于表達病毒載體和生產(chǎn)疫苗。它們對多種病毒高度寬容,通常用于生產(chǎn)病毒疫苗,如流感、狂犬病和脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗,表現(xiàn)出良好的轉(zhuǎn)染效率,并且適用于粘附培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)。
 
優(yōu)點:BHK細胞支持病毒載體的有效復制,并經(jīng)常用于生產(chǎn)重組病毒,包括逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒和腺病毒。由于它們能夠在懸浮培養(yǎng)中生長到高細胞密度,因此非常適合大規(guī)模生產(chǎn)。
 
應用:BHK細胞用于生產(chǎn)用于基因治療、疫苗開發(fā)和病毒學研究的病毒載體。
 
4.NS0和SP2/0骨髓瘤細胞:
 
特點:NS0和SP2/0骨髓瘤細胞是小鼠來源的骨髓瘤細胞系,通常用于生產(chǎn)單克隆抗體。這些細胞表現(xiàn)出與產(chǎn)生抗體的B細胞的高融合效率,并且可以用于產(chǎn)生用于產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞系。
 
優(yōu)點:NS0和SP2/0細胞具有高水平的抗體分泌能力,可適應懸浮培養(yǎng)大規(guī)模生產(chǎn)。提供穩(wěn)定和連續(xù)的抗體生產(chǎn),并與各種表達載體和選擇系統(tǒng)兼容。
 
應用:NS0和SP2/0細胞用于生產(chǎn)單克隆抗體,用于治療、診斷和研究目的。
 
5.小鼠胚胎成纖維細胞(MEFs):
 
特征:MEFs是來源于小鼠胚胎的原代成纖維細胞,通常用于誘導多能干細胞(iPSC)的產(chǎn)生和重組蛋白的生產(chǎn)。它們表現(xiàn)出良好的轉(zhuǎn)染效率,并且可以支持體細胞有效地重編程為iPSC。
 
優(yōu)點:MEF為iPSC的培養(yǎng)提供了一個飼養(yǎng)層,并支持其在未分化狀態(tài)下的擴增和維持。它們可用于生產(chǎn)用于基因治療應用的重組蛋白和病毒載體。
 
應用:MEFs用于哺乳動物細胞的iPSC生成、蛋白質(zhì)表達和基因編輯研究。
 
6.人細胞系(例如,HEK293T、HeLa、A549):
 
        在哺乳系統(tǒng)表達中會使用各種人類細胞系,例如HEK293T、HeLa和A549。這些細胞系提供了諸如類人蛋白表達和翻譯后修飾模式等優(yōu)勢,使其特別適用于涉及人類蛋白或蛋白質(zhì)復合物表達的應用。人類細胞系通常用于研究目的,包括功能研究、蛋白質(zhì)相互作用和藥物篩選。
 
       每種哺乳動物細胞系都提供了適合不同應用的特定優(yōu)勢和特性,哺乳動物細胞的選擇取決于各種因素,如所表達蛋白質(zhì)的性質(zhì)、所需的翻譯后修飾和預期的下游應用。
來源:卡梅德生物科技(天津)有限公司
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