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                                                              English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 破壁機(jī)在胞內(nèi)分枝桿菌破壁制備上的應(yīng)用

                                                              破壁機(jī)在胞內(nèi)分枝桿菌破壁制備上的應(yīng)用

                                                              瀏覽次數(shù):3007 發(fā)布日期:2022-2-7  來源:官網(wǎng)

                                                              引言:分枝桿菌屬( Mycobacterium)是一類細(xì)長略彎曲的桿菌,因有分枝生長的趨勢而得名。細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì),主要是分枝菌酸,一般不易著色,若經(jīng)加溫或延長染色時間而著色后能抵抗強(qiáng)脫色劑鹽酸乙醇的脫色,故又稱抗酸桿菌,且不易破壁。本次實驗ATS破壁機(jī)將樣品做兩部分處理,對比破壁結(jié)果。

                                                              實驗對象 
                                                              胞內(nèi)分枝桿菌

                                                              實驗儀器
                                                              高速離心機(jī)
                                                              ATS破壁機(jī)
                                                              顯微鏡


                                                              實驗背景
                                                              分枝桿菌屬( Mycobacterium)是一類細(xì)長略彎曲的桿菌,因有分枝生長的趨勢而得名。本菌屬的顯著特性為:①細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì);②無鞭毛、無芽胞,也不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素;③對人致病的主要有結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌;④所致感染多為慢性過程,長期遷延并有破壞性的組織病變。

                                                              實驗難點
                                                              細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì),主要是分枝菌酸,一般不易著色,若經(jīng)加溫或延長染色時間而著色后能抵抗強(qiáng)脫色劑鹽酸乙醇的脫色,故又稱抗酸桿菌,且不易破壁。

                                                              實驗?zāi)康?/strong>
                                                              將胞內(nèi)分枝桿菌進(jìn)行破壁,后續(xù)提取蛋白。

                                                              實驗工藝
                                                              1.預(yù)處理:將滅活后的胞內(nèi)分枝桿菌液體(非結(jié)核)分為兩部分,一部分不作處理;一部分做堿處理,離心后去上清加水再重懸。
                                                              2.實驗工藝:ATS破壁機(jī)搭配一級模塊后,控低溫處理。


                                                              實驗結(jié)果
                                                              A.未處理的菌液破壁結(jié)果
                                                              通過對菌液進(jìn)行抗酸染色后觀察,破壁前菌液呈紫色,在破壁次數(shù)相同的條件下,隨著壓力的增高,胞內(nèi)分枝桿菌顏色偏向藍(lán)色。

                                                               

                                                              100倍油鏡顯示,壓力越高,破壁效果越好。(壓力排序:A<B<C<D)

                                                              破壁前

                                                              破壁后

                                                              B.堿處理菌液破壁結(jié)果
                                                              同壓力同次數(shù)下,堿處理后的菌液破壁效果明顯提高。

                                                                 

                                                                         (堿處理)                                              (未處理)


                                                              實驗小結(jié)
                                                              1.從染色結(jié)果和顯微鏡觀察結(jié)果可以看出,未處理的菌液經(jīng)不同壓力處理后,都有一定程度的細(xì)菌破壁,且壓力越高,破壁效果越好。
                                                              2.堿處理有助于破壁,比同壓力未處理的菌液破壁結(jié)果更好,細(xì)胞更細(xì)碎。
                                                              來源:安拓思納米技術(shù)(蘇州)有限公司
                                                              聯(lián)系電話:400-998-7088
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                                                              標(biāo)簽: 細(xì)胞破壁
                                                              用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
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