在生物技術藥物的研發(fā)領域，單克隆抗體類藥物由于具有廣泛的臨床應用前景，已經(jīng)成為了研究熱點。組織交叉反應（TCR）試驗是在臨床前評價單抗類藥物的安全性的重要手段，不僅可以確定非臨床安全性試驗的相關動物種屬，還可以預測藥物的毒性靶器官。目前免疫組織化學技術、組織芯片技術、Western印跡分析技術以及流式細胞等技術也都開始應用于組織交叉反應試驗。
單克隆抗體藥物具有對抗原結合的特異性，可作用于表達其抗原表位的靶組織。因此如果在正常組織中存在相同或相似的抗原表位，單克隆抗體可能會與靶組織以外的其他組織發(fā)生結合，從而產(chǎn)生嚴重的不良反應。開展TCR試驗是區(qū)分“在靶”結合的靶器官和“脫靶”結合的非靶器官的重要手段，同時還可以用于毒性評價的動物種屬的選擇提供參考。
相關動物種屬指的是表達與人相同的靶抗原并表現(xiàn)出相似的組織交叉反應特性的動物種屬。目前,主要使用體外免疫組織化學、Western印跡分析等的方法,在正常人及實驗動物組織評估有無交叉反應,要求在新藥臨床申請Ⅰ期臨床試驗前完成。
毒理研究的目的是了解毒性反應劑量、時間、強度、癥狀、靶器官及可逆性等，為臨床方案提供參考、預測出現(xiàn)的毒性反應，制訂臨床防護措施、保證受試者用藥安全。美迪西毒理研究設置的功能實驗室包括：動物飼養(yǎng)室、中心實驗室、毒代實驗室、分子生物學實驗室、細胞室、遺傳毒性實驗室、病理實驗室、解剖室、供試品保管室、供試品配置室、檔案室等。內(nèi)設SPF級實驗室、大動物實驗室和普通實驗室，可進行猴、狗、家兔、豚鼠、大鼠、小鼠等不同種屬動物實驗研究。。
組織交叉反應(TCR)是用于評價抗體或抗體類生物技術藥物與人或實驗動物組織是否存在潛在結合位點的實驗方法。如在西妥昔單克隆抗體與正常人的組織交叉反應的研究中，有研究者評價了西妥昔單克隆抗體與正常人組織的免疫交叉反應,并與已上市對照藥物愛必妥組織交叉反應的結果進行比較,評價西妥昔單抗與上市對照品愛必妥的一致性,為西妥昔單抗藥效學、安全性評價中所使用動物種屬的選擇及西妥昔單抗臨床使用與研究提供依據(jù)。
還有研究者采用免疫組化方法檢測人源性單克隆抗體與人和食蟹猴冰凍組織的組織交叉反應。該實驗選用靈敏性高的ABC法,基本原理為冰凍組織切片加入一抗,再加入生物素標記的二抗,再加ABC復合物(含HRP)與生物素(Biotin)結合,HRP催化DAB顯色等等。
當相同或相關抗原決定簇在人非預定的細胞或靶組織表達時，可觀察到抗體與它們結合。非靶組織結合可能具有嚴重后果，特別是使用藥理活性抗體或細胞毒性免疫結合物時。因此，一般在I期臨床試驗前應經(jīng)過用人組織或細胞進行交叉反應性或非靶組織結合的實驗室檢測。然而組織交叉反應在動物種屬選擇中作用有限，因此在充分暴露并評估藥物的安全性的研究時，需要建立和完善生物技術藥物的臨床前的安全評價體系的基礎，并根據(jù)藥物作用機制設計和開展試驗，選擇適宜的實驗動物，設定合理的試驗劑量和檢測恰當?shù)纳�理指標�?