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大小鼠尾靜脈注射難點(diǎn)指導(dǎo)

瀏覽次數(shù):13332 發(fā)布日期:2019-8-8 
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中采用的給藥方法眾多,根據(jù)藥物性質(zhì)和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌,需要采用不同的給藥方式,如上一期介紹的灌胃、腹腔、皮下注射及靜脈注射給藥,在這幾種給藥方式中尾靜脈給藥難度最大,卻也是我們不可或缺的實(shí)驗(yàn)技能。今天,就和大家分享下尾靜脈注射的技巧。

本次文章內(nèi)容豐富全面,主要分為2部分,尾靜脈注射基本步驟和技術(shù)深度分析與拓展,涵蓋幾種小鼠品系的尾靜脈注射技巧,并附有專業(yè)視頻分析,非常值得大家閱讀哦!

Part Ⅰ   實(shí)驗(yàn)基本步驟

1. 準(zhǔn)備工作 (1ml注射器,酒精棉球,小鼠固定器)如下圖:

2. 小鼠的固定  (3種方式)

尾靜脈注射時(shí)需要把小鼠固定,前部有氣孔保證小鼠呼吸,后部可以將尾部拉出,露出尾巴即可。最好使用小鼠固定器,不要讓小鼠在固定器中有太多活動(dòng)空間,防止注射時(shí)亂動(dòng)。

然而我們卻總是面臨小鼠固定器損壞或丟失的情況,或者有的同學(xué)壓根嫌棄固定器,覺得安裝起來太麻煩,這里分享給大家2個(gè)替補(bǔ)的好方案,簡(jiǎn)單快捷。

籠蓋壓尾法:動(dòng)物籠蓋子露出尾巴,注射時(shí)最好讓人幫你扶住籠子,固定住小鼠。

離心管固鼠法: 用手邊50ml離心管,底部開若干小口便于小鼠呼吸,然后把蓋子戳一個(gè)洞,拉出鼠尾,為了讓小鼠順利進(jìn)入離心管,可用黑布包裹試管,注射時(shí)用膠帶把離心管固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。

3. 找準(zhǔn)尾靜脈,并擴(kuò)張血管

相信有一個(gè)困惑很多人的問題,尾靜脈到底是哪條?這么細(xì)小,能扎進(jìn)去嗎?

首先,想找準(zhǔn)小鼠靜脈血管,必須了解尾靜脈組成。結(jié)合下圖所示:

一般來講,小鼠尾部有3條靜脈,位于背側(cè)和左右兩側(cè),由于背部靜脈較深且細(xì),一般選擇左右兩側(cè)尾靜脈進(jìn)行注射;另外1條動(dòng)脈,位于腹側(cè)。

第二步:擴(kuò)張靜脈血管(3種途徑)

鑒于小鼠尾靜脈細(xì)小并且不明顯,所以在注射之前需要將血管擴(kuò)張,便于注射。

① 可以將小鼠尾部在45~50℃左右溫水浸浴2min,以擴(kuò)張靜脈;

② 用酒精擦拭血管,可使血管擴(kuò)張,同時(shí)也可軟化表皮角質(zhì);

③ 利用紅外線烤燈加熱鼠尾3-5min,使靜脈充盈。

4. 注射(最關(guān)鍵最困難部分)

當(dāng)我們準(zhǔn)備好注射藥物,找準(zhǔn)尾靜脈固定后,就開始進(jìn)行注射了。具體步驟如下:

①左手固定鼠尾,右手持注射器,第一次注射從距尾尖2~3cm處(1/3處)進(jìn)針。在這進(jìn)針的原因有2個(gè):此處皮膚較薄,血管清晰,進(jìn)針容易;而且一旦注射不成功,再次注射時(shí)有更多近端注射的余地;

②右手進(jìn)針時(shí)針頭與桌面平行,一旦進(jìn)入,將針頭稍稍上挑;

③待針頭進(jìn)入血管后見回血,立即注射,注射時(shí)可明顯地感覺到針行通暢,毫無阻力,代表注射成功;若針頭不在靜脈血管中,手感針行有阻力,注射失;

④注射完畢后,為了避免藥物流出,針頭緩慢旋轉(zhuǎn)抽出;

⑤注射后小鼠傷口處理,用紗布或者酒精棉球按壓傷口,直到不出血為止,一般3-5min,這樣有利于創(chuàng)口盡快恢復(fù),以利于下次注射。

注意事項(xiàng):

① 進(jìn)針時(shí)不要太深,針頭入血管后馬上把針頭略往上,平行進(jìn)針;

② 注射時(shí)如果阻力較大,甚至出現(xiàn)滲液,則說明不在靜脈內(nèi),需要拔出再次注射;

③注射時(shí)推液時(shí)不要過快,平緩注射;

④注射器吸入藥液后,務(wù)必一定要將空氣推出,防止因空氣進(jìn)入心臟,造成小鼠死亡,切記:不可注射含有空氣的液體。

便于更好理解,以裸鼠和小白鼠為例,請(qǐng)大家花1min時(shí)間,觀看下面視頻:

https://v.qq.com/x/page/x0395gqs2tf.html

Part Ⅱ   技術(shù)深度分析與拓展

1. 注射成功案例分析

結(jié)合上面動(dòng)圖,我們可以看到注射成功的特點(diǎn):

① 進(jìn)針時(shí),針頭可見少量回血,代表注射到靜脈

② 注射到靜脈,推液幾乎沒有阻力

③ 隨著藥液推進(jìn),能清晰看到液體在血管流動(dòng)

④ 拔針時(shí),傷口處會(huì)有少量血液和藥液的混合物

如下圖為注射成功后的尾巴:傷口處會(huì)有少量血液和藥液的混合物

2. 注射失敗案例分析

結(jié)合上面動(dòng)圖,我們可以看到注射失敗的特點(diǎn):

① 如果注射到靜脈以外,強(qiáng)行推液,阻力較大

② 注射時(shí),液體無法進(jìn)入從而導(dǎo)致血管變白

③ 出針后,對(duì)于有大量血或者藥液大量滲出

④ 由于失敗后尾部會(huì)有淤血,尾巴顏色變暗并腫脹

如下圖為注射失敗的尾巴:有大量血液和藥液的混合液滲出

3. 不同品系的小鼠如何對(duì)待

不同品系的小鼠尾靜脈的組成幾乎是一樣的,只是不同品系和膚色的小鼠尾巴的識(shí)別度不一樣,所以我們需要區(qū)別對(duì)待。

① 裸鼠(注射最簡(jiǎn)單)尾巴如下圖:

因?yàn)槁闶蟮撵o脈血管呈扁平狀且細(xì)小,但特別容易識(shí)別,因此在各類小鼠品系中注射最簡(jiǎn)單;按上述操作即可。

② 小白鼠 (注射比較簡(jiǎn)單)尾巴如下圖:

一般小白鼠的靜脈血管在酒精擦拭后,比較清晰可見,注射時(shí)比較簡(jiǎn)單。

③ 小黑鼠(注射最難)尾巴如下圖:

小黑鼠的血管不易辨別,所以需要紅外燈等外界條件輔助下,充分刺激后使其血管盡量擴(kuò)張,便于識(shí)別;另外尾巴皮膚較硬,適當(dāng)控制力度。

4. 靜脈注射物為:細(xì)胞系、病毒、細(xì)菌時(shí)等如何處理?

尾靜脈注射除了作為一種常見的給藥方式,也有很多其他應(yīng)用。如全身性的白血病模型、小鼠乳腺癌肺部轉(zhuǎn)移模型,均需要將腫瘤細(xì)胞利用尾靜脈方式注射。例如還有模擬其他細(xì)菌、病毒等感染模型,也常需要尾靜脈注射。

注射手法和藥物注射基本一樣,但還是需要注意一下幾點(diǎn)!

① 相比藥液,注射的細(xì)胞更加粘稠,所以一定要均勻稀釋后,吸入注射器;

②確認(rèn)靜脈血管后,由于細(xì)胞,細(xì)菌及病毒等對(duì)小鼠身體傷害大,一定緩慢注射,過快會(huì)造成小鼠休克,嚴(yán)重的話會(huì)造成小鼠死亡;

③ 注射大量細(xì)胞或者病毒后,小鼠會(huì)變得虛弱,體溫變涼,需放置于37℃的恒溫平臺(tái)上;

④ 腫瘤細(xì)胞、病毒及細(xì)菌等注射時(shí),一定要做好防護(hù)工作,避免液體濺出,造成自身傷害。

5. 對(duì)于SD大鼠的注射

基本操作步驟和小鼠差不多,重點(diǎn)是在于:

① 老鼠個(gè)體大,一定要固定好保證一定不能亂動(dòng);

② 充分暴露尾靜脈,可以拿溫水多泡或者酒精多擦試幾次。

看了咱們這篇圖文并茂的文章,有沒有覺得尾靜脈注射并不難呢,牢記文章所說的幾點(diǎn)實(shí)驗(yàn)技巧,并且心平氣和地地多加練習(xí),相信你一定可以完成。當(dāng)然了,如果你的實(shí)踐操作中有任何難題,可以給我們留言,我們盡力幫你解答。

來源:上海邦耀生物科技有限公司
聯(lián)系電話:021-64340008
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