測定戊巴比妥鈉（ 57-33-0） 腹腔注射對小鼠催眠作用的 ED50值。 戊巴比妥鈉為巴比妥類鎮(zhèn)靜催眠藥，用適當(dāng)劑量給小鼠腹腔注射后產(chǎn)生的催眠效應(yīng)， 常用翻正反射的消失來判斷， 該指標(biāo)僅有陽性（ 睡眠） 和陰性（ 不睡眠） 兩種現(xiàn)象， 屬于質(zhì)反應(yīng)。 質(zhì)反應(yīng)量效曲線的橫坐標(biāo)為對數(shù)劑量， 而縱坐標(biāo)采用陽性反應(yīng)發(fā)生的頻數(shù)時， 一般為常態(tài)分布曲線。 如改用累加陽性頻數(shù)為縱坐標(biāo)時， 可以得到標(biāo)準(zhǔn)的 S 型曲線。 該曲線的中央部分（ 50%反應(yīng)處） 接近一條直線， 斜度最大， 其相應(yīng)的劑量也就是能使群體中半數(shù)個體出現(xiàn)某一效應(yīng)的劑量， 通常稱為半數(shù)效應(yīng)量。 如效應(yīng)為療效， 則稱半數(shù)有效量（ ED50） ； 如效應(yīng)為死亡， 則稱半數(shù)致死量（ LD50） 。 這些數(shù)值是評價藥物作用強(qiáng)度和藥物安全性的重要參數(shù)。 021-51602548
孫氏改進(jìn)的 Kaerber 法的設(shè)計條件是： 各組實驗動物數(shù)相等， 各組劑量呈等比數(shù)列， 各組動物的反應(yīng)率大致符合常態(tài)分布。

若以 Xm 為最大反應(yīng)率組劑量的對數(shù)， i 為組間劑量比的對數(shù)， p 為各組反應(yīng)率， Pm 為最高反應(yīng)率， Pn 為最低反應(yīng)率， n 為實驗組數(shù)， 則：ED50＝ lg-1[Xm－ i（ ∑ P－ 0.5） ＋ i/4（ 1－ Pm－ Pn） ]含 0%及 100%反應(yīng)率時，ED50＝ lg-1[Xm－ i（ ∑ P－ 0.5） ]ED50的 95％ 可信限＝ lg-1（ lgED50± 1.96· S）其中 S＝ i

二、 實驗材料

小鼠 50 只， 1% 戊巴比妥鈉（ sodium pentobarbital solution） 小鼠籠， 天平， 0.5ml 或 0.25ml 注射器。

三、 實驗步驟

1、確定給藥劑量：先以少量動物做預(yù)實驗，以獲得小鼠對戊巴比妥鈉催眠反應(yīng)率為 100％ 的最小劑量（ ED100）
和反應(yīng)率為 0％ 的最大劑量（ ED0） 。 然后在此劑量范圍內(nèi)， 按等比數(shù)列分成幾個劑量組（ 一般 4～ 8 組） ，
各組劑量的公比（ r） 為 r＝ n-1√ ED100/ED0
求得 r 后， 自第一劑量組（ ED0） 開始乘以 r， 可得相鄰的下一個組的劑量。 若共分為 5 個組， 各組劑量分
別為 ED0、 r· ED0、 r2· ED0、 r3· ED0、 r4· ED0、 r5· ED0。
2、 給藥： 取體重 25g 左右的健康小鼠 50 只， 查隨機(jī)數(shù)字表， 隨機(jī)分為 5 個組， 每組 8 只(除去極端重量小
鼠 2 只)。 按表 1 所列的各組給藥濃度分別腹腔注射 0.1ml/10g。
3、 記錄結(jié)果： 以翻正反射消失為入睡指標(biāo)， 觀察藥物的催眠效應(yīng)， 記錄各組腹腔注射后 15min 內(nèi)睡眠鼠數(shù)，
填入表 1。

四、 實驗結(jié)果

表 1 計算戊巴比妥鈉 ED50用表

根據(jù)表 1 的數(shù)據(jù)和上述公式可求得 ED50=31.90

注意事項

1、 為減少誤差， 由 1 人配藥
2、 保持環(huán)境安靜
3、 如果第一組出現(xiàn)陽性動物， 則向下按公比增加一個低劑量組(d0=d1/r)
4、 最后一組動物未全部陽性， 向上增加一個劑量(dk+1=dkr)

實驗動物的麻醉方法，除了使用戊巴比妥鈉進(jìn)行注射麻醉，還可以選擇使用異氟烷氣體麻醉：

小動物氣體麻醉機(jī)

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