主要用途
YIJI蛋白樣品沉淀法去內(nèi)毒素試劑是一種旨在通過特殊多肽化合物溶液結(jié)合脂多糖類物質(zhì),達(dá)到清除
蛋白樣品中混雜的內(nèi)毒素分子的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明
的。其適用于各種重組蛋白制備樣品以及血清樣品的純化。產(chǎn)物可用于各種后續(xù)動(dòng)物和細(xì)胞生物學(xué)操作。
產(chǎn)品即到即用,性能穩(wěn)定,操作方便,清除效率高。
技術(shù)背景
內(nèi)毒素(Endotoxin)是一種脂多糖(Lipopolysaccharides;LPS),革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞膜的組成成分。在
重組蛋白純化過程中,細(xì)菌裂解釋放出內(nèi)毒素,伴隨著目標(biāo)蛋白,嚴(yán)重干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)。YIJI去內(nèi)毒素
技術(shù)采用了高度電荷性的兩性環(huán)脂肽化合物(amphiphilic cyclic peptidolipid)溶液,通過特異性結(jié)合脂多糖
分子的脂質(zhì)A 區(qū)域(lipid A region),產(chǎn)生復(fù)合物,中和內(nèi)毒素,充分有效地清除樣品中高濃度內(nèi)毒素(4000
至 40000 EU/毫升)和其它親脂性物質(zhì),高達(dá)99%以上效率。
產(chǎn)品內(nèi)容
YIJI去毒液(Reagent A) 毫升
產(chǎn)品說明書 1 份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融,有效保證6 月
用戶自備
1.5 毫升離心管:用于樣品操作的容器
微型臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀分層
渦旋震蕩儀:用于混勻反應(yīng)物
恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)物
平式搖蕩儀:用于混勻反應(yīng)物
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 從-70℃冰箱里取出蛋白樣品,置于冰槽里融化
2. 移取1 毫升蛋白樣品(1 至5 毫克蛋白總量)到1.5 毫升離心管
3. 加入 微升YIJI去毒液(Reagent A)
4. 渦旋震蕩15 秒
5. 在 4℃條件下,置于平式搖蕩儀上孵育2 小時(shí),速度為50RPM
6. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心10 分鐘,速度為1000g(或3500RPM,例如EPPENDORF 5415)
1
7. 小心移取上清液到新的1.5 毫升離心管
8. 保存在-70℃冰箱里備用或即刻進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品為20 次操作
2. 操作時(shí),須戴手套
3. 使用時(shí),避免污染母液
4. YIJI去毒液(Reagent A)避免反復(fù)凍融
5. 不同樣品容量的操作,建議相應(yīng)調(diào)整試劑用量:樣品容量與試劑用量之比為10:1
6. 如果樣品中內(nèi)毒素含量過高,建議重復(fù)操作
7. 血清樣品采用相同操作步驟,但須無菌操作
8. 100 毫升菌液的平均內(nèi)毒素含量可高達(dá)15000 EU(30 微克),介于5000 至50000 EU
9. 去內(nèi)毒素程度取決于樣品中內(nèi)毒素含量和樣品性質(zhì)(細(xì)菌來源、融合蛋白特性),可以通過多次處理,
達(dá)到徹底清除的效果;如果效果不甚理想,建議使用本公司的其它相關(guān)產(chǎn)品
10. 經(jīng)過本產(chǎn)品處理后的產(chǎn)物內(nèi)毒素含量可低于0.03EU/毫升
11. 本公司提供系列內(nèi)毒素處理試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定去內(nèi)毒素程度高