综合图区亚洲网友自拍|亚洲黄色网络|成人无码网WWW在线观看,日本高清视频色视频kk266,激情综合五月天,欧美一区日韩一区中文字幕页

English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個(gè)人登錄 | 郵件訂閱
當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 如何構(gòu)建腫瘤皮下注射模型?關(guān)鍵三點(diǎn)做到位,腫瘤皮下注射模型so easy!

如何構(gòu)建腫瘤皮下注射模型?關(guān)鍵三點(diǎn)做到位,腫瘤皮下注射模型so easy!

瀏覽次數(shù):10463 發(fā)布日期:2017-1-19  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

由于更能模擬人類的生理和病理?xiàng)l件,所以在科研上,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)獲得的結(jié)果,比體外實(shí)驗(yàn)更具有說服力。在腫瘤增殖方向的研究中,也通常會(huì)構(gòu)建相應(yīng)的動(dòng)物模型來開展進(jìn)一步的研究,皮下注射模型是最常規(guī)的方式。

那么如何構(gòu)建腫瘤皮下注射模型呢?

關(guān)鍵三點(diǎn)做到位,腫瘤皮下注射模型so easy!

選取什么樣的樣本進(jìn)行注射?

1. 組織塊

選擇生長良好,無液化壞死的魚肉狀的腫瘤組織塊進(jìn)行接種。這樣的腫瘤組織生命力旺盛,活力強(qiáng)。當(dāng)然,為了保證成功率,接種的時(shí)間也很關(guān)鍵,最好是切除后1小時(shí)內(nèi)就接種。

組織塊一般來源于臨床的腫瘤樣本,或是在動(dòng)物體內(nèi)已經(jīng)建立的腫瘤模型樣本。

臨床樣本直接進(jìn)行接種能較好的保持病人腫瘤的特性,因其含有較全的腫瘤生長微環(huán)境,可以為臨床藥物提供最有效的指導(dǎo);但是其來源比較困難,在動(dòng)物體內(nèi)致瘤性也較差。

已經(jīng)建立腫瘤模型的樣本大大提高了其再次成瘤的能力,一個(gè)瘤體可以切成十幾二十幾份進(jìn)行接種,也很大程度上降低了細(xì)胞培養(yǎng)的成本,適合一些成瘤能力較弱的腫瘤細(xì)胞。但是它也是需要先通過細(xì)胞注射建立腫瘤模型,且由于接種的樣本都是靠人工剪切,很難保證接種后成瘤的均一性。

2. 腫瘤組織懸液

選取生長狀態(tài)良好,活力強(qiáng)的腫瘤組織,加生理鹽水或細(xì)胞培養(yǎng)液在勻漿器內(nèi)研磨制成懸液后進(jìn)行接種。

它一定程度上可以提高成瘤的均一性,但是研磨勻漿的過程容易導(dǎo)致樣本活性降低,使其成瘤能力減弱。

3. 腫瘤細(xì)胞

取處于生長旺盛的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行移植。

腫瘤細(xì)胞接種時(shí)可以進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),可控性較強(qiáng),均一性也較好。

但是目前常見的一些細(xì)胞系的“年齡“較大,大部分都?xì)v經(jīng)了幾百上千代的培養(yǎng),細(xì)胞的基因組和行為可能都已發(fā)生了改變。

因此,最終可以根據(jù)研究課題的實(shí)際情況進(jìn)行合理選擇。

要選擇什么樣的動(dòng)物進(jìn)行注射呢?

1. BALB/c裸鼠:先天性胸腺發(fā)育缺陷,無被毛,T細(xì)胞功能缺失。其較好的成瘤能力以及無毛便于觀察的特性使其成為腫瘤模型中最常用的工具鼠。

 

2. NOD-SCID鼠:先天性T、B、部分NK淋巴細(xì)胞聯(lián)合免疫缺陷動(dòng)物,其免疫缺陷程度比裸鼠更徹底,但是有白色被毛,不便于接種及觀察。

3. NSG/NOG/NCG小鼠:NOD/SCID 鼠遺傳背景,Il2rgnull,其NK細(xì)胞活性幾乎喪失,是目前免疫缺陷程度最高的工具小鼠。但是由于價(jià)格比較昂貴,來源較少,目前使用并不廣泛。

通常情況下選擇裸鼠建立腫瘤模型即可,如腫瘤惡性程度非常低,可以考慮使用免疫缺陷程度更徹底的工具小鼠,如需要建立其他特殊的模型則需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x用合適品系的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

要注射在哪些部位?

在選擇接種部位時(shí)我們需要根據(jù)不同的癌種/細(xì)胞,不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡纫蛩鼐C合考慮。

首先,腫瘤需要通過血管吸收宿主的營養(yǎng)成分以供其生長,所以一般情況下可以接種在腋下、腹股溝、頸背部等血管豐富的地方。

其次,腫瘤需要一定的空間供其生長,所以需要選擇皮膚寬松的地方,如背部兩側(cè)。

另外,還需要考慮到實(shí)驗(yàn)人員觀察、測(cè)量的便利性,以及盡可能降低對(duì)動(dòng)物正常生理活動(dòng)的影響,所以頭部、腹部、四肢附近等部位都不是第一選擇。

最后,就是實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡目紤],或是一些特殊癌種的需求;如乳腺癌接種脂肪墊研究其原位成瘤及轉(zhuǎn)移能力;黑色素瘤接種于皮內(nèi)以提高其致瘤性。

經(jīng)驗(yàn)?zāi)煤茫?/STRONG>

1. 需要對(duì)有被毛的小鼠接種時(shí),可以在接種前2-3天對(duì)接種部位使用物理(剃毛器)或化學(xué)(脫毛膏)方法進(jìn)行脫毛處理,一旦出現(xiàn)傷口小鼠也有時(shí)間愈合,不至于影響接種實(shí)驗(yàn)。

2. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從其他地方購買過來后需要1-2天的適應(yīng)期,以免動(dòng)物發(fā)生應(yīng)激反應(yīng),影響成瘤效果。

3. 腫瘤細(xì)胞接種前一天對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化傳代,可以使細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期,保證細(xì)胞活性,細(xì)胞在收集前,細(xì)胞匯合率不要太高, 70~80%即可。

4. 腫瘤細(xì)胞收集下來后如果無法及時(shí)接種,可用錫紙包裝,并存放于碎冰中,以防止細(xì)胞因溫度過高而導(dǎo)致結(jié)團(tuán)或者細(xì)胞狀態(tài)不佳。

5. 細(xì)胞接種時(shí),進(jìn)針長度至少要超過半個(gè)針頭;進(jìn)針時(shí),針的斜面朝上;打完后慢慢抽針,針出來后壓一壓進(jìn)針口和鼓出部位之間,防止細(xì)胞液流出來造成細(xì)胞數(shù)的差異。


長按加關(guān)注


用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊(cè) 忘記密碼
評(píng)論只代表網(wǎng)友觀點(diǎn),不代表本站觀點(diǎn)。 請(qǐng)輸入驗(yàn)證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com