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高大上的CarT慢病毒是怎樣煉成的(二)

瀏覽次數(shù):4445 發(fā)布日期:2016-4-18  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

要做行業(yè)新標(biāo)準(zhǔn),看看我們有多狠;
為了高大上,搭上精力和成本;
搞定絕對又定量,推出質(zhì)量控制高精準(zhǔn);
如何做到高精準(zhǔn)?看我大QC如何能!
子明曰:“慢病毒質(zhì)量靠啥控制?”
子怒曰:大QC!大QC!大QC!
大QC,就是對慢病毒設(shè)立一些檢測的項(xiàng)目,對每一管慢病毒進(jìn)行全面體檢。通過了這些QC檢測項(xiàng)目,質(zhì)量自然就高大上;通不過的,就地銷毀!銷毀!銷毀!
子明又曰:“大QC檢測項(xiàng)目有哪些? 如何檢測?”
子又怒曰:“看表!“
參考中國藥典、FDA對生物制劑給出的經(jīng)典方法,對吉?jiǎng)P基因慢病毒一一篩查、甄別。
 

檢測項(xiàng)目 檢測方法
支原體 Nest PCR
內(nèi)毒素 LAL
病毒毒性 LDH
 細(xì)菌 培養(yǎng)法
真菌 培養(yǎng)法
活性滴度 絕對定量

子明再曰:“QC的檢測項(xiàng)有代表意義么?“
子垂死病中驚坐起曰:“娃兒問得好!“
慢病毒是絕不允許微生物污染存在的。細(xì)胞支原體污染是世界性問題,支原體由于小而簡單,很容易逃過純化過程中濾膜的攔截;細(xì)胞細(xì)菌污染一旦發(fā)生,往往無法挽救。細(xì)菌污染短時(shí)間內(nèi)培養(yǎng)基變黃,混濁物飄起,細(xì)胞停止生長甚至死亡;對細(xì)胞存在威脅的真菌種類繁多,短時(shí)間內(nèi)不易察覺,對后續(xù)功能研究的危害是不可修復(fù)的;內(nèi)毒素是由革蘭氏陰性菌分泌的脂多糖,內(nèi)毒素能通過兩種途徑進(jìn)入血液導(dǎo)致內(nèi)毒素血癥;病毒毒性由病毒雜質(zhì)引起的,雜質(zhì)含量越高,病毒毒性越大,病毒毒性會導(dǎo)致細(xì)胞直接性死亡。
 
細(xì)胞一污染,實(shí)驗(yàn)要重復(fù),老板心疼錢,畢業(yè)要延期……
所以,不惜一切代價(jià),我們要把萬惡之源扼殺在大QC里!
那么,問題來了,吉?jiǎng)P大QC如何做到?
答:數(shù)據(jù)會說話
統(tǒng)計(jì)吉?jiǎng)P基因慢病毒QC大數(shù)據(jù),(囊括200組過表達(dá)、200組干擾實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù))
咱將吉?jiǎng)P結(jié)果和FDA要求匯總?cè)缦卤碇校?/STRONG>
 
檢測項(xiàng)目 吉?jiǎng)P檢測結(jié)果 單位 FDA參考范圍
支原體 陰性 -- 陰性
內(nèi)毒素 <50 EU/ml <50
病毒毒性  無毒性 -- 無毒性
細(xì)菌 陰性 -- 陰性
真菌 陰性 -- 陰性
活性滴度 1.0E+8-2.0E+9 TU/ml ≥1E+8
 

準(zhǔn)確到不能更加準(zhǔn)確的檢測方法,以數(shù)據(jù)說話!
 
最后,專業(yè)性的附帶在實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的異,F(xiàn)象可能存在的原因,請仔細(xì)對好嘍:

再核對自己手上的病毒:
有木有得到支原體-free承諾?
有木有得到細(xì)菌-free承諾?
有木有得到真菌-free承諾?
有木有低內(nèi)毒素承諾?
有木有低病毒毒性承諾?
有木有絕對定量定滴度?
沒有么?都沒有么?!
那還等什么,扔掉病毒,找吉?jiǎng)P,找吉?jiǎng)P,找吉?jiǎng)P呀!
吉?jiǎng)P慢病毒的宗旨是
病毒質(zhì)量好,細(xì)胞杠杠滴,實(shí)驗(yàn)倍兒順利,課題奔跑中,畢業(yè)在前方!

 


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