聚苯乙烯－二乙烯基苯微球(polystyrene divinyl benzene beads, PST)具有剛性大，耐受有機(jī)溶劑性能好，pH值的適用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，是一種非常有應(yīng)用前途的層析介質(zhì)。同多糖型凝膠微球相比較，交聯(lián)聚合物微球的骨架結(jié)構(gòu)具有更高的機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)穩(wěn)定性，所以更適合能經(jīng)受高流速高壓力操作的液相色譜使用。中國科學(xué)院過程工程研究所國家生化工程技術(shù)研究中心采用SPG(Shirasu Porous Glass)膜乳化技術(shù)與懸浮聚合法相結(jié)合的方法制備了尺寸均一的PST微球分離介質(zhì)，同普通的PST介質(zhì)相比，該方法制得的微球粒徑均一，分辨率高，下面是該介質(zhì)的理化性質(zhì)分析和應(yīng)用研究。

 

    以國家生化工程技術(shù)研究中心（北京）研發(fā)生產(chǎn)的產(chǎn)品為例。聚苯乙烯微球介質(zhì)粒徑均一，粒徑、孔徑、比表面積可控，其理化性質(zhì)如下：

 

 

 

    聚苯乙烯微球由于是強(qiáng)疏水性的苯乙烯和二乙烯基苯的共聚物，因此可以直接用作反相層析（色譜）介質(zhì)。聚苯乙烯微球介質(zhì)的突出優(yōu)點(diǎn)是粒徑分布均一、且粒徑可控，因此在實(shí)際的層析（色譜）分離過程中可以有效避免溝流、壓降不穩(wěn)定等缺點(diǎn)。此外，該聚苯乙烯微球還具有較高的比表面積500 m2/g，最高可達(dá)1000 m2/g，因此在高流速下可以獲得更高的分辨率、載量和更低的反壓。由于具有上述優(yōu)點(diǎn)，聚苯乙烯微球介質(zhì)已得到廣泛應(yīng)用，成功實(shí)現(xiàn)了紫杉醇、淫羊藿甙、石杉堿甲（乙）、白藜蘆醇等天然產(chǎn)物以及多肽組分的分離純化。

 

    圖2為IPE-PST30介質(zhì)分離苯同系物（苯、甲苯、二甲苯）的色譜圖，結(jié)果顯示三種苯同系物在聚苯乙烯反相層析柱（300×10mm ID）上實(shí)現(xiàn)了有效分離，表明該介質(zhì)裝填的層析柱具有很高的分辨率，適用于精細(xì)分離。

 

    表2為聚苯乙烯微球介質(zhì)對多醇類天然產(chǎn)物白藜蘆醇苷、白藜蘆醇及蒽苷B的分離效果。結(jié)果顯示，本介質(zhì)對于上述三種結(jié)構(gòu)類似物具有分辨率、產(chǎn)品純度及回收率各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)均優(yōu)良的分離效果，純度及回收率均達(dá)到進(jìn)口產(chǎn)品Source30的水平，而優(yōu)于C18的水平。

層析柱	白藜蘆醇		蒽苷B		白藜蘆醇苷
	純度 %	回收率%	純度 %	回收率%	純度 %	回收率%
C18	87.6	75.2	83.6	82.1	86.2	75.4
IPE-PST30	93.1	92.5	93.8	92.2	92.8	92.1
Source 30	94.6	90.5	93.1	91.7	92.6	93.7

 

    中科亞光公司對合成多肽進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)表明，該產(chǎn)品（IPE-PST30）具有高分辨率和高回收率的優(yōu)點(diǎn)。其中，對人工合成15肽一步純化后可使純度由38.1%提高到78.6%；對人工合成16肽純化后可使純度由35.7%提高到89.1%；對人工合成18肽純化后可使純度35.7%提高到92.0%，回收率達(dá)到22%（如圖3所示）。

                     (a) 粗品的HPLC分析譜圖                (b) 半制備柱純化譜圖（300×10mm ID）

(c) 純化后的多肽HPLC分析

 

    本中心生產(chǎn)的聚苯乙烯微球介質(zhì)已獲得生化工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心、中科亞光生物科技有限公司等單位廣泛應(yīng)用，在天然產(chǎn)物、多肽的分離純化中獲得了良好的應(yīng)用效果。

 

    本中心生產(chǎn)多種粒徑的聚苯乙烯微球介質(zhì)，如需更多的詳細(xì)資料，歡迎各位新老客戶來電詳洽：

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