如今蛋白組學研究方法在近年來受到了越來越廣泛的應用，各種不同的蛋白組學研究方法也在不斷的推陳出新，檢測精度，靈敏度，以及廣度都在不斷的提升。對于蛋白質組學研究來說，出發(fā)點多是大規(guī)模研究多個蛋白的表達特性來達到鑒定新的標志物的目的。由此以來，shotgun proteomics作為大規(guī)模分析的蛋白組學研究手段在研究蛋白組學初期很適用。但是shotgun proteomics雖然涉獵廣，但是鑒定的精度卻相對較低。相反，靶向研究組學勝在精準度，鑒定的蛋白數量卻會打些折扣。因此，研究者們一直想要尋找結合精度和廣度兩個特征的蛋白組學研究方法。SWATH正好能夠滿足這兩個特征。

這期跟大家分享一篇關于SWATH在不同實驗室間可重復性的研究，文章于今年四月份發(fā)表在Nature Communication雜志。

SWATH-MS數據可重復性研究－百泰派克生物

SWATH是一項真正意義上的全景質譜檢測手段，能夠檢測復雜樣品中幾乎所有分子。SWATH的原理是通過將MS質譜分成多個小窗口，再對每個窗口的每個離子進行MS/MS檢測，從而達到對所有分子的深度檢測。同時SWATH的檢測精度與MRM靶向蛋白組學鑒定處于相當水平。集合了檢測廣度和精度兩大優(yōu)勢，SWATH是研究者們研究蛋白組學的理想手段。

但是在此之前，SWATH的研究數據的重復度只在實驗室內部得到很好的驗證，而對于不同的實驗室之間SWATH數據重復度還沒有得到驗證。由于復雜的樣品往往受到的影響因素較多，數據的重復度相對較低。因此，這篇文章主要研究了SWATH在世界上不同的實驗室之間的數據鑒定重復度的問題。這個研究統(tǒng)計了全世界11個不同的實驗室中使用SWATH鑒定的數據重復度情況。

實驗結果

1. 作者把30個肽段標準品分為5組，每組6個標準品按照5個稀釋梯度混入HEK293T細胞裂解液中，再在選定的6個國家中的11個實驗室中使用SWATH方法對以上樣品進行分析。分析一共獲得229個SWATH－MS文件，接下來再對數據的現行動態(tài)范圍等數據進行分析。

2. 結果表明在11個實驗室中鑒定的蛋白總數大體是一致的，基本都位于4000左右的范圍。

3. 作者進一步分析了同一實驗室和不同實驗室間變異系數的范圍，結果表明標準品和HEK293蛋白的變異系數均在20%左右。

4. 另外，對標準品和樣品的動態(tài)范圍分析也都呈現良好的線性結果

5. 作者對11個實驗室鑒定的蛋白進行聚類和相關性分析，數據呈現出高度的對稱性，表明SWATH－MS鑒定和數據分析在不同的實驗室間能夠有高度的重現性。

實驗結論
綜上，結果表明在這11個實驗室使用SWATH能夠在HEK293T細胞中重復地鑒定至少4000個蛋白。并且，蛋白鑒定的變異系數低，蛋白鑒定均呈現相似的線性動態(tài)，并且蛋白聚類和相關性分析也都一致。因此，結論就是SWATH不僅在實驗室內部有著高重復度，在實驗室間的數據重現行也是極高的，這也再次驗證SWATH鑒定的可靠性。