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                                                              English | 中文版 | 手機版 企業(yè)登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 斑馬魚用于識別癌變和腫瘤進展的研究

                                                              斑馬魚用于識別癌變和腫瘤進展的研究

                                                              瀏覽次數(shù):1222 發(fā)布日期:2021-8-27  來源:MedChemExpress
                                                              斑馬魚和青鳉魚都是模式生物界冉冉升起的新星。尤其是斑馬魚,這種水生生物的外表和哺乳動物相比,簡直風(fēng)馬牛不相及,為什么越來越多的用于疾病領(lǐng)域呢?

                                                              研究顯示,斑馬魚和人類基因組的同源性高達 70% 以上。斑馬魚的基因組與人類疾病相關(guān)基因的相似性高達 80%。和人相比,斑馬魚的生理機能非常保守 (有時候比嚙齒類動物更保守),如心臟電生理學(xué)。

                                                               

                                                              此外,斑馬魚和人類一樣,會自然的產(chǎn)生癌變,且大多數(shù)致癌基因和腫瘤抑制基因在進化上是保守的。由于斑馬魚的相對透明性,可用于識別癌變和腫瘤進展的研究。與哺乳動物不同,斑馬魚的胚胎是在外部發(fā)育的。斑馬魚還有著遠優(yōu)于哺乳動物的繁殖能力,性成熟的雌性斑馬魚,平均每條魚 1-2 天可產(chǎn)卵幾十到幾百顆。

                                                              圖 1. 斑馬魚有多適合人類藥物研究?[1]

                                                              圖 2. 不同模式生物間的比較[2]

                                                               

                                                              體外給藥
                                                              細胞實驗
                                                              細胞的孵育和給藥與哺乳動物細胞基本一致,但培養(yǎng)溫度不一樣 (魚類細胞一般是 28 攝氏度)。這里就不贅述啦,大家都是老手了。
                                                              胚胎實驗
                                                              研究顯示,像 DMSO、DMF、乙醇、***這些常見的小分子藥物溶劑,斑馬魚胚胎和幼體的耐受度在 0.5-2.5% (孵育時間 24 小時)。
                                                              以 DMSO 為例,細胞實驗中一般不超過 0.1%,而斑馬魚胚胎和幼體通常暴露于高達 1% DMSO 環(huán)境中,斑馬魚毒性實驗中,胚胎對 2.5% DMSO 耐受性都很好。友情提示,大多數(shù)胚胎孵育,DMSO 終濃度還是控制在 0.1% 以下的喲。不要輕易在危險的邊緣試探喲!

                                                              圖 3. 斑馬魚對常見有機溶劑的耐受程度[3]

                                                               


                                                              體內(nèi)給藥
                                                              腹腔注射
                                                              先用麻藥 (如 Tricaine 100-120 mg/mL) 將魚麻醉 30-60s (直到只看得到鰓在動,切忌太久,超過 20-30s 就可能造成斑馬魚死亡),使用微量進樣器注射 5-10 μL 左右。2016 年,發(fā)表在 Dis Model Mech 期刊上的一篇研究,斑馬魚口服給藥,DMSO 濃度達到了 10%。
                                                              藥浴
                                                              Terfenadine 誘導(dǎo)斑馬魚 QTc 延長的實驗中,使用藥浴的方式進行處理,DMSO 終濃度達到了 1%,孵育時間為 10 分鐘。


                                                              青鳉個體小、繁殖快、近交品系多、突變體多,有完整的基因組序列,與大多數(shù)魚類不同,青鳉具有二倍體染色體結(jié)構(gòu),是唯一擁有雄性性別決定基因和雌性決定基因的脊椎動物。多種干細胞系的建立為研究基因功能所需的細胞生物學(xué)研究提供了良好的平臺。ZFN 和 TALENs,尤其是 CRISP Cas9 技術(shù)在青鳉中均已成功應(yīng)用。越來越多的學(xué)者以青鳉為模式物種進行生殖細胞發(fā)育等功能研究。

                                                               

                                                               

                                                               

                                                              參考文獻

                                                              1. Kerstin Howe, Derek L. Stemple, et al. The zebrafish reference genome sequence and its relationship to the human genome. Nature. 2013 Apr 25;496(7446):498-503.

                                                              2. Calum A MacRae, and Randall T Peterson. Zebrafish as tools for drug discovery. Nat Rev Drug Discov. 2015 Oct;14(10):721-31.

                                                              3. CongXu-9-The zebrafish as a model for human disease. Fish Physiology Volume 29, 2010, Pages 345-365.

                                                              4. Keon Yong Lee, Kwan Hyi Lee, et al. Zebrafish models for functional and toxicological screening of nanoscale drug delivery systems: promoting preclinical applications. Biosci Rep. 2017 Jun 8;37(3):BSR20170199.

                                                              5. Jan Maes, Alexander D Crawford, et al. Evaluation of 14 organic solvents and carriers for screening applications in zebrafish embryos and larvae. PLoS One. 2012;7(10):e43850.

                                                              6. Adam Stewart, Allan V. Kalueff, et al. Intraperitoneal Injection as a Method of Psychotropic Drug Delivery in Adult Zebrafish. Neuromethods. 2011.

                                                              7. Girish Hari Chaudhari, et al. Optimization of the adult zebrafish ECG method for assessment of drug-induced QTc prolongation. J Pharmacol Toxicol Methods. Mar-Apr 2013;67(2):115-20.

                                                              8. Stephan Kirchmaier, Felix Loosli, et al. The genomic and genetic toolbox of the teleost medaka (Oryzias latipes). Genetics. 2015 Apr;199(4):905-18.

                                                              9. Y Wakamatsu, K Ozato, et al. Fertile and diploid nuclear transplants derived from embryonic cells of a small laboratory fish, medaka (Oryzias latipes). Proc Natl Acad Sci U S A. 2001 Jan 30;98(3):1071-6.

                                                               

                                                              發(fā)布者:上海皓元生物醫(yī)藥科技有限公司
                                                              聯(lián)系電話:021-58955995
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