細胞形態(tài)異常，魚骨圖來幫忙（四）

瀏覽次數(shù)：2689　發(fā)布日期：2019-10-16　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負

DuangDuangDuang~
BI中國市場部又來給大家送福利啦
我們的魚骨圖分析即將接近尾聲啦
大家有沒有感覺收獲頗豐？

本期我們將繼續(xù)介紹可能出現(xiàn)問題的部分---培養(yǎng)基
如下圖所示：

接下來我們將從以下幾點進行分析：

血清

不同批號血清內(nèi)的成分和營養(yǎng)組成比例會不同，因此在實驗過程中，需要經(jīng)過測試來找尋合適的血清批次。當(dāng)實驗需要更換血清時，細胞需要有一段適應(yīng)期。有些批號適合養(yǎng)神經(jīng)細胞或間充質(zhì)干細胞等。

解決方案：

1.建議少量換置，以使用體積1/3，1/2，2/3的方式漸進式置換。
2.提高血清比例增加營養(yǎng)讓細胞更快速適應(yīng)。
3.一次采購足量血清避免經(jīng)常更換批號。
4.需注意購買血清的真?zhèn)危垊?wù)必從正規(guī)經(jīng)銷商處購買。如遇價格低廉或不明通路（未經(jīng)冷鏈全程運送）都需提高警惕。

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

基礎(chǔ)培養(yǎng)基以形態(tài)可分為干粉培養(yǎng)基和液態(tài)培養(yǎng)基。
干粉培養(yǎng)基：自行配置時，需要注意是否需另外添加營養(yǎng)物或必須物至培養(yǎng)基中（如：碳酸氫鈉）并調(diào)整pH值。
液態(tài)培養(yǎng)基：使用不適合的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，細胞仍可生長但特性會改變。培養(yǎng)基中常用的酚紅（pH指示劑）本身有微弱雌激素作用，會刺激具有雌激素受器的細胞生長。
解決方案：
BI提供不同細胞專用無血清培養(yǎng)基，各式基礎(chǔ)培養(yǎng)基。（詳情請戳此處）

添加因子

在臨床及科學(xué)研究實驗中，常需外加生長因子活化細胞或促進分化，建議最好選購不含動物或人衍生物質(zhì)的高活性，高純度重組蛋白，以確保產(chǎn)品活性符合嚴格規(guī)范。

常見使用的添加因子如：細胞因子（Cytokine），這是一類小分子蛋白質(zhì)或多肽類，這些因子可以幫助細胞生長，促進細胞活化，直接參與免疫調(diào)節(jié)作用和其他細胞因子的形成，也是細胞與細胞之間訊息傳遞的重要橋梁。在正常生理狀況下細胞受到刺激后也會自然分泌因子，不同種類的細胞因子也會具有不同的免疫功能，然而過度的細胞因子分泌也可能會引發(fā)炎癥反應(yīng)，可直接、間接誘導(dǎo)或抑制細胞凋亡。

一些動物來源，組分復(fù)雜的添加劑，如動物源的基底質(zhì)，批間差比全合成或單一組分試劑大，使用時必須小心注意。

解決方案：
逍鵬生物提供科研及cGMP級別細胞因子、小分子化合物等。

光照

避免紫外線照射培養(yǎng)基，以防培養(yǎng)基中的HEPES、核黃素及色氨酸形成過氧化氫自由基，對細胞造成毒害作用。

解決方案：
如需長時間觀察細胞，如Live cell imaging，可選用CELL Guidance Systems：LiveLight^TM光穩(wěn)定培養(yǎng)基系列：
1.MEMO培養(yǎng)基（取代DMEM），Cat No.：M06-100/M06-500
2.NEUMO培養(yǎng)基（取代Neurobasal），Cat No.：M07-100/M07-500
3.SOS補充劑（取代B-27），Cat No.：M09-20/M09-50

谷氨酰胺

不同的細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)基中都需加入一定量的谷氨酰胺，作為培養(yǎng)細胞的能量來源，參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。谷氨酰胺缺乏會導(dǎo)致細胞生長不良甚至死亡。谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解，谷氨酰胺的降解會導(dǎo)致氨的形成，而氨對于一些細胞具有毒性。加有谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲存兩周以上時，應(yīng)重新加入谷氨酰胺，或可直接選用添加長效型谷氨酰胺的培養(yǎng)基。

解決方案：

1. BI可提供：

名稱

貨號

L-Glutamine Solution, 29.2mg/ml in Saline (200 millimole/liter)

谷氨酰胺溶液

03-020-1

L-Alanyl-L-Glutamine (Stable Glutamine), 200 mM per liter

谷氨酰胺溶液（長效型）

03-022-1

2. 提供各式細胞培養(yǎng)輔助試劑。（點我）

來自以色列Israel的新年祝福（BI過年嘍）！