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BI科學顧問與人類胚胎干細胞建系故事(上集)
(以下為重點節(jié)錄,原文全文請見文后鏈結)
1997年,「由冷凍人類胚胎分離人類胚胎干細胞」的提案送到以色列海法的瑞本醫(yī)學中心 (Rambam Medical Center) 審議委員會 (IRB),提案在兩個月后通過,項目正式展開。
在取得冷凍人類胚胎所有者的同意后,36個冷凍胚胎于1998年初,以液態(tài)氮由以色列送到美國威斯康辛,伊茨科維茨-艾爾多博士的學生米哈爾阿米特 (Michal Amit) 全程護送,并留在湯姆森博士的實驗室,詳細記錄所有分離胚胎干細胞的流程與結果。
1998年 1月22日,項目展開后不久,研究團隊由美國實驗室新鮮未凍存的測試胚胎樣品得到第一個ESC colony,并確立第一個人類胚胎干細胞系,H1。之后,以色列提供的冷凍胚胎投入實驗,共有19個胚胎發(fā)育成為囊胚,其中有13個囊胚成功分離ICM (inner cell mass) 并培養(yǎng)在老鼠胚胎成纖維細胞上,最后得到4個人類胚胎干細胞系 (H7,H9,H13,和H14)。
人類胚胎干細胞系H9的分離過程
A. 分離的9號胚胎ICM培養(yǎng)在老鼠胚胎成纖維細胞上
B. H9 群落形成
C. H9 細胞形成
D. 分化的H9細胞
當時,全世界很多實驗室都參予了這場「人類胚胎干細胞建系競賽」,誰第一個分離出人類胚胎干細胞,就可以名留青史;湯姆森博士的目標是拿到世界第一,所以必須在1998年底前發(fā)表文章,這代表他必須在9個月內完成一系列的文章及資料審查,眼看著自己即將抵達賽程終點,研究團隊深深感受到被時間追著跑的壓力。
湯姆森博士終于在1998年8月將文章送到《科學》期刊 (Thomson et al., 1998),由于題目極新穎所以很快就被接受、并確定發(fā)表時間;但在文章順利通過審查的喜悅下,卻埋藏著違反倫理道德的焦慮與不安,因為當時,破壞人類胚胎在很多國家是違法行為,隨著文章發(fā)表時間越來越近,研究團隊對于未知輿論的壓力越來越大,深怕那些反對的破壞行為,會扼殺全世界的干細胞研究。為了避免一切可能的風險,兩位博士決定在文章發(fā)表前夕,將5個人類胚胎干細胞系 (H1,H7,H9,H13,和H14) 用干冰包裹,并以小行李箱放在頭等艙的行李架上運往以色列。
以色列瑞本醫(yī)學中心在取得5個人類胚胎干細胞系后,與威斯康辛校友研究基金會 (Wisconsin Alumni Research Foundation,WARF,負責威斯康辛大學與校外組織的合作研究項目) 簽訂材料移轉同意書,明確承諾不可用于臨床與商業(yè)用途,這也是后來人類胚胎干細胞研究遵循的基礎。自此,5個人類胚胎干細胞系在以色列瑞本醫(yī)學中心13樓伊茨科維茨-艾爾多博士實驗室落地生根,這是第一個在美國境外培養(yǎng)人類胚胎干細胞系的實驗室。
此后,伊茨科維茨-艾爾多博士實驗室也陸續(xù)建立I3,I4,和I6人類胚胎干細胞系,這8個H和I系列人類胚胎干細胞系在美國總統(tǒng)布什任內,登錄美國NIH體系,明確規(guī)定只能用于科學研究,且不得再產出新的人類胚胎干細胞系,一直到2009年美國總統(tǒng)奧巴馬才解除人類胚胎干細胞系的限制。
以色列瑞本醫(yī)學中心
(圖片來源:https://www.rambam.org.il 以色列瑞本醫(yī)學中心官網)留存人類胚胎干細胞系的壓力非常大,文章發(fā)表后,全球實驗室希望分享細胞系的請求絡繹不絕,伊茨科維茨-艾爾多博士必須對各實驗室的人類胚胎干細胞系實驗進行審核,確保不會用于臨床與商業(yè)用途,而美國威斯康辛研究基金會也會不時探訪;最后,新的捐贈者同意書依照美國NIH的要求修訂完成,加入將人類胚胎干細胞及衍生物使用于臨床與商業(yè)用途的相關條件,而伊茨科維茨-艾爾多博士也取得最初胚胎捐贈者的新修訂授權同意書。
20年來,伊茨科維茨-艾爾多博士不僅建立了人類胚胎干細胞分化擬胚體實驗系統(tǒng),也提供人類胚胎干細胞系及相關的技術支持給全球研究學者,對于人類胚胎干細胞研究有極為卓越的貢獻,而伊茨科維茨-艾爾多博士與人類胚胎干細胞的旅程 還 在 繼 續(xù) 。
支持iPS和ES細胞增殖并維持細胞多能性,穩(wěn)定傳代,不刺激細胞分化。
無血清無異源成分,不含細胞因子。
配合Vitronectin預包被培養(yǎng)器皿使用,支持無滋養(yǎng)層培養(yǎng);
亦可將Vitronectin直接加入培養(yǎng)基中操作后續(xù)實驗。
內含HSA,相較E8培養(yǎng)基,增殖能力更強。
周末不換液(最長可達60小時)。
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