數(shù)字PCR應用文獻|用數(shù)字PCR方法單次實驗同時檢測EGFR活化突變位點和耐藥突變位點
通常生物學樣本量有限,通過單次實驗獲得足夠多的信息對于研究人員和診斷人員至關(guān)重要。NaicaTMcrystal數(shù)字PCR系統(tǒng)實現(xiàn)了單次實驗中同時檢測和定量多重生物標志物,并確保數(shù)據(jù)精準度和可信度,通過3個不同的熒光通道,非常明確地區(qū)分靶標位點。這種簡單快速的技術(shù)平臺能夠兼容多種熒光染料組合,大大地擴展了實驗設計的可能性。
在NSCLC(非小細胞肺癌)治療中,EGFR(表皮生長因子受體)是重要的藥物作用靶點。EGFR活化突變位點,如L858R和L861Q用于預測TKIs(酪氨酸激酶抑制劑)藥物藥效,同時EGFR T790M突變用于一代TKIs藥物耐藥預測。
為能夠在單次實驗中評估TKIs藥物反應,在NaicaTMcrystal數(shù)字PCR系統(tǒng)上進行的多重數(shù)字PCR實驗,實現(xiàn)了同時檢測EGFR L858R、L861Q、T790M和野生型EGFR。在野生型背景下,可以成功并準確地檢測到終濃度低至0.25 copies/µL的突變,對應的突變檢測限為0.05% (Figure A,B,C)。
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