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                                                              English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個(gè)人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > 凍存細(xì)胞時(shí),還在堅(jiān)持緩凍原則嗎?

                                                              凍存細(xì)胞時(shí),還在堅(jiān)持緩凍原則嗎?

                                                              瀏覽次數(shù):7702 發(fā)布日期:2019-3-28  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
                                                              一、我們先來說說何為緩凍:
                                                                     緩凍即為凍存細(xì)胞時(shí),要程序降溫——4℃ 30min,-20℃ 1h ,-80℃ 過夜,次日投入液氮內(nèi)。
                                                              二、那為什么要進(jìn)行緩凍呢?
                                                                     其實(shí)所謂的緩凍是一般使用傳統(tǒng)凍存液凍存過程中需要程序降溫。
                                                                     傳統(tǒng)的凍存液,一般由胎牛血清、DMSO及基礎(chǔ)培養(yǎng)基等組分組成。凍存保護(hù)的DMSO組分,在進(jìn)入細(xì)胞后結(jié)合細(xì)胞內(nèi)部的水份,降低冰點(diǎn),防止細(xì)胞在冷凍過程中形成冰晶對(duì)細(xì)胞造成損害。
                                                                     但是DMSO只能在細(xì)胞內(nèi)部保護(hù)細(xì)胞,細(xì)胞外部沒有保護(hù),水結(jié)冰晶會(huì)在細(xì)胞膜外部受到損傷,為了防止冰晶過大,使用時(shí)必須采用程序降溫的方式,才可保證細(xì)胞復(fù)蘇的成功率(80%以上)。
                                                                     若不采用程序降溫的形式,有些凍存的細(xì)胞,甚至復(fù)蘇成功率為0。

                                                              三、無血清細(xì)胞凍存液幫您輕松凍細(xì)胞!


                                                                     無血清細(xì)胞凍存液,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),大大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。
                                                                     一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,我公司無血清細(xì)胞凍存液,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),大大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。


                                                              附:
                                                              1.傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液與無血清細(xì)胞凍存液使用方法對(duì)比
                                                              使用步驟 傳統(tǒng)凍存液 無血清凍存液
                                                              產(chǎn)品保存條件 分裝成小管,-20度(避免反復(fù)凍融 2-8度保存,無需分裝
                                                              凍存過程 程序降溫(4度30min, -20度1h ,-80度過夜,次日投入液氮內(nèi)) 直投-80度冰箱過夜,次日入液氮
                                                              復(fù)蘇過程 快復(fù)蘇,加新鮮培養(yǎng)液,離心取出保護(hù)液 快復(fù)蘇,加新鮮培養(yǎng)液,離心取出保護(hù)液

                                                               

                                                              2.凍存后細(xì)胞復(fù)蘇數(shù)據(jù)對(duì)比

                                                              細(xì)胞系名稱

                                                              傳統(tǒng)凍存液

                                                              YOCON凍存液

                                                              A549(肺癌)

                                                              85%

                                                              95%

                                                              MDCK(犬腎細(xì)胞)

                                                              90%

                                                              95%

                                                              3T3(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)

                                                              90%

                                                              93%

                                                              hepG2(肝癌細(xì)胞)

                                                              86%

                                                              93%

                                                              MK2 (恒河猴腎細(xì)胞)

                                                              88%

                                                              95%

                                                              雜交瘤細(xì)胞

                                                              80%

                                                              90%

                                                              MSC(間充質(zhì)干細(xì)胞)

                                                              80%

                                                              95%

                                                              單個(gè)核細(xì)胞(原代分離)

                                                              50%

                                                              90%

                                                               
                                                              來源:友康恒業(yè)生物科技(北京)有限公司
                                                              聯(lián)系電話:010-58711655
                                                              E-mail:[email protected]

                                                              標(biāo)簽: 細(xì)胞凍存
                                                              用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊(cè) 忘記密碼
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