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小鼠乳腺癌細胞(4T1)培養(yǎng)要點

瀏覽次數(shù):368 發(fā)布日期:2024-11-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負
細胞名稱:小鼠乳腺癌細胞
細胞簡稱4T1
產(chǎn)品貨號TCM-C705
種屬來源小鼠
組織來源乳腺
細胞形態(tài)上皮細胞樣
生長特性貼壁生長
培養(yǎng)體系RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
傳代比例:1:3-1:6,每2-3天換液一次
傳代周期:48-72 h
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%CO2,溫度:37℃

4T1細胞培養(yǎng)注意要點

1. 小鼠乳腺癌細胞(4T1)細胞特性

① 小鼠乳腺癌細胞(4T1)為貼壁細胞,上皮細胞樣,細胞在低密度時及傳代第二天會有少量細胞為圓形或沒有上皮細胞形態(tài)的細胞,期間不要換液,一般傳代48h后會恢復(fù)正常。

② 4T1傳代周期較短,在標準培養(yǎng)體系RPMI-1640+10%FBS中,倍增時間在24h左右,細胞傳代比例1:6-1:8,傳代周期2-3天。

2. 小鼠乳腺癌細胞(4T1)注意事項

① 4T1細胞密度越高消化時間越長,建議細胞密度80%進行傳代,消化時間約5-10min。(不同品牌、不同溫度的胰酶可能消化時間有區(qū)別)

② 4T1細胞在密度高于80%,或者在同一個培養(yǎng)器皿中培養(yǎng)時間過長,會導(dǎo)致細胞難消化,推薦使用分步消化的方式進行。

4T1細胞推薦消化步驟:

a. 去除細胞上清,使用0.25%胰酶替代PBS清洗一遍;

b. 加入適量胰酶,放入37℃培養(yǎng)箱消化,5min左右取出觀察一次;

c. 如觀察到有大部分細胞變圓,可輕拍瓶身,如細胞不可脫落則延長消化時間。

d. 如觀察到有部分細胞脫落,則將已經(jīng)脫落的細胞懸液收集到離心管中加入完全培養(yǎng)基中止消化,原瓶中再次加入新鮮胰酶重復(fù)消化一次。

e. 將分次消化的細胞懸液集中在一起進行離心,去除上清后按照1:6-1:8的比例進行分瓶。

f. 傳代后第二天細胞不需要換液處理,一般2-3天即可長滿。

③ 血清質(zhì)量差異可能引起倍增時間波動,建議選用高質(zhì)量的胎牛血清。推薦使用4T1細胞專用培養(yǎng)基(TCM-G705)。

來源:蘇州海星生物科技有限公司
聯(lián)系電話:4009906627
E-mail:hfx@dingbio.com

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