文獻(xiàn)速遞|M2生物芯片點(diǎn)樣儀助力抗體共價(jià)偶聯(lián)過(guò)程及流動(dòng)特性研究
 

 

微流控芯片集成了樣品反應(yīng)、處理和分離整個(gè)過(guò)程，與傳統(tǒng)檢測(cè)方式相比，具有體積小、試劑消耗少、檢測(cè)時(shí)間短、操作方便等諸多特點(diǎn)。因此，被廣泛應(yīng)用在分子診斷和即時(shí)檢測(cè)(POCT)領(lǐng)域。

微流控芯片的免疫檢測(cè)反應(yīng)是一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程，需要將反應(yīng)物持續(xù)運(yùn)送到固相載體表面。目前，大多研究集中在免疫反應(yīng)的底物上，而對(duì)反應(yīng)物的流量以及流速等特性的研究十分有限。如何結(jié)合微流控芯片內(nèi)部結(jié)構(gòu)得到最佳流速的免疫檢測(cè)，成為芯片表面修飾技術(shù)急需解決的問(wèn)題之一。本文研究了幾種聚苯乙烯亞基表面修飾的工藝，用于闡明抗體固定與流速對(duì)免疫反應(yīng)效果的影響。抗體采用共價(jià)結(jié)合的方式進(jìn)行固定，基于酶聯(lián)免疫吸附原理進(jìn)行熒光定量檢測(cè)及免疫應(yīng)答過(guò)程的評(píng)估。另外，以降鈣素原為例，系統(tǒng)地研究了抗體共價(jià)偶聯(lián)過(guò)程和流動(dòng)特性對(duì)免疫檢測(cè)結(jié)果的影響，為免疫檢測(cè)微流控芯片的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)提供理論基礎(chǔ)。

芯片設(shè)計(jì)和免疫反應(yīng)原理如圖1所示：使用德國(guó)M2生物芯片點(diǎn)樣儀將標(biāo)記物(熒光微球)點(diǎn)印在反應(yīng)區(qū)，特異性抗體點(diǎn)印在測(cè)試區(qū)(僅與感興趣的抗原結(jié)合)，非特異性抗體點(diǎn)印在對(duì)照區(qū)(只與標(biāo)記物或抗原結(jié)合)。當(dāng)含有抗原的血液流經(jīng)反應(yīng)區(qū)時(shí)，抗原在反應(yīng)區(qū)與標(biāo)記物結(jié)合，通過(guò)檢測(cè)區(qū)后，標(biāo)記抗原被特異性抗體捕獲，形成“抗體-抗原-抗體免疫復(fù)合物”，從而產(chǎn)生熒光，當(dāng)血液流入控制區(qū)域時(shí)非特異性抗體捕獲未結(jié)合的標(biāo)記抗體。最后使用熒光定量分析儀進(jìn)行熒光信號(hào)分析。

結(jié)果顯示：對(duì)血液中降鈣素原檢測(cè)過(guò)程中，研究人員發(fā)現(xiàn)平均流速約為0.2 mm/s時(shí)免疫反應(yīng)信號(hào)最強(qiáng)；與氨基和醛基修飾相比，環(huán)氧基修飾的芯片抗體免疫效率最高，對(duì)于小分子基團(tuán)修飾的芯片，引入聚L -賴氨酸可以增加抗體的固定數(shù)量。

原文鏈接：https://doi.org/10.1080/10826068.2021.1958344

M2-Automation成立于2003年，總部位于德國(guó)柏林，是一家創(chuàng)新技術(shù)開(kāi)發(fā)公司，專注于微量/超微量、非接觸式自動(dòng)化移液和生物芯片點(diǎn)樣技術(shù)。儀器準(zhǔn)確性、精確性高，重復(fù)性好，全程自動(dòng)化點(diǎn)樣，同時(shí)可根據(jù)客戶需求進(jìn)行定制。
 

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