腺病毒的介紹及病毒注射實(shí)驗(yàn)安全操作須知

瀏覽次數(shù)：1134　發(fā)布日期：2023-11-30　來(lái)源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

什么是腺相關(guān)病毒？

腺相關(guān)病毒（Adeno-associated viruses，�？s寫(xiě)為AAV），是一種隸屬細(xì)小病毒科依賴性細(xì)小病毒屬、能夠感染人類以及其他部分靈長(zhǎng)類動(dòng)物的病毒。腺相關(guān)病毒直徑約20納米、無(wú)被膜，無(wú)法自主完成復(fù)制，全基因組長(zhǎng)約4.8千堿基對(duì)（kb）^[1][2]

腺相關(guān)病毒因毒性低、不能自主復(fù)制、不致病，且較少整合到宿主基因組中，因而被認(rèn)為是一種較為理想的基因治療載體，廣泛應(yīng)用于基因過(guò)表達(dá)、基因敲除、基因干擾表達(dá)和內(nèi)源基因過(guò)表達(dá)。

腺相關(guān)病毒對(duì)人體的危害？
腺相關(guān)病毒 (AAV) 與大多數(shù)病毒不同，它需要同時(shí)存在輔助病毒才能進(jìn)行主動(dòng)感染。高達(dá) 80% 的人群 AAV 抗體血清呈陽(yáng)性。AAV 已知是一種非致病性病毒，目前尚不清楚 AAV 會(huì)引起任何人類疾病。但是最近的報(bào)告已確定 AAV 插入突變是發(fā)生肝細(xì)胞癌的潛在因素^[3]。

除此之外，關(guān)于 AAV 感染與不良生殖結(jié)局（如胎盤(pán)并發(fā)癥、自然流產(chǎn)和生育障礙）的發(fā)生之間的關(guān)系，以及 AAV 感染與 HPV 相關(guān)宮頸癌發(fā)生的保護(hù)作用之間的關(guān)系等等，目前對(duì)此研究結(jié)果不一致，因而關(guān)于 AAV 自然感染的許多問(wèn)題尚沒(méi)有定論^[4]。

注射病毒如何正確防護(hù)？
* 實(shí)驗(yàn)室管理要求：
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)滿足二級(jí)生物實(shí)驗(yàn)室要求，即P2實(shí)驗(yàn)室。相當(dāng)于BSL-2實(shí)驗(yàn)室。主要用于初級(jí)衛(wèi)生服務(wù)、診斷和研究。其實(shí)驗(yàn)對(duì)象的危害等級(jí)為二級(jí)：能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物（中等個(gè)體危害、有限群體危害）

* 實(shí)驗(yàn)人員防護(hù)要求：
1.病毒使用前，操作人員應(yīng)當(dāng)充分了解病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)安全問(wèn)題，加強(qiáng)安全操作意識(shí)。在實(shí)驗(yàn)操作中，穿戴好實(shí)驗(yàn)服、口罩、護(hù)目鏡以及一次性手套，盡量不要裸露雙手以及手臂皮膚。

2.病毒操作時(shí)，注意避免蛋白酶或細(xì)菌污染，建議使用 DNase/RNase-Free 耗材進(jìn)行操作。操作過(guò)程中如果有病毒濺出，立即使用70%酒精加1% SDS溶液擦拭消毒。

3.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，請(qǐng)用84溶液浸泡接觸過(guò)病毒的槍頭、離心管和玻璃電極，消殺病毒至少20 min。實(shí)驗(yàn)人員請(qǐng)及時(shí)用肥皂水清潔雙手。所有生物廢料的處理均需遵從公共機(jī)構(gòu)發(fā)布的和所處機(jī)構(gòu)制定的規(guī)范條例執(zhí)行。

4.若眼睛、皮膚等不小心接觸到病毒，請(qǐng)立即用大量清水沖洗。若病毒接觸到傷口等部位，立即用10%碘伏溶液擦洗之后，用大量清水沖洗，建議沖洗時(shí)間至少20 min。

病毒注射所需的設(shè)備

* MP-500玻璃微電極拉制儀：

加熱片固定卡槽—操作簡(jiǎn)便
內(nèi)置拉制模版—智能高效
一體式插拔濕度控制室—人性化設(shè)計(jì)

* R-480注射泵：

高精度、密封性好、注射運(yùn)行穩(wěn)定

* 動(dòng)物麻醉系統(tǒng)：

一體化機(jī)身設(shè)計(jì)
麻醉過(guò)程穩(wěn)定可控
雙通道獨(dú)立控制
低應(yīng)激誘導(dǎo)，高效氣體回收

* 腦立體定位儀：

精準(zhǔn)穩(wěn)定、種類齊全、適配多種實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景

參考資料
[1]Naso, Michael F.; Tomkowicz, Brian; Perry, William L.; Strohl, William R. Adeno-Associated Virus (AAV) as a Vector for Gene Therapy. BioDrugs. 2017, 31 (4): 317–334.
[2]Wu, Zhijian; Yang, Hongyan; Colosi, Peter. Effect of Genome Size on AAV Vector Packaging. Molecular Therapy. 2010, 18 (1): 80–86.
[3]Araujo, Natalia M. "A dual role for adeno-associated virus in human health." Virology Journal 20.1 (2023): 228.
[4]Sant’Anna, Thaís B., and Natalia M. Araujo. "Adeno-associated virus infection and its impact in human health: an overview." Virology Journal 19.1 (2022): 173.

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