D-熒光素鉀鹽如何標(biāo)記小鼠?用量是多少?
瀏覽次數(shù):383 發(fā)布日期:2023-7-28
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1. 體外生物發(fā)光檢測(cè):用無(wú)菌純凈水對(duì)D-熒光素鉀鹽進(jìn)行溶解,配制30mg/mL的儲(chǔ)備溶液,分裝后在-20℃避光條件下保存。在37℃恒溫條件下預(yù)熱處理組織培養(yǎng)基10-20分鐘,再將處理后的培養(yǎng)基倒入儲(chǔ)存液中,稀釋至0.15-0.3 mg/mL的工作液濃度。之后再去除混液中的細(xì)胞培養(yǎng)基。等待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,恒溫37℃條件下孵育5-10 min,之后再進(jìn)行圖像分析。
2. 活體成像分析:采用無(wú)菌的DPBS緩沖液配制成為15 mg/mL的熒光素的儲(chǔ)存液,混勻。使用水系0.2 µm真是濾器過(guò)濾對(duì)儲(chǔ)備液進(jìn)行除菌處理,處理后可即使使用,或者在-20℃避光條件下保存。腹腔注射(i.p.):按照150 mg/kg 的熒光素/體重濃度比例進(jìn)行注射;注射入體內(nèi)10-15 min后(等待光信號(hào)達(dá)到最強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期)之后,再進(jìn)行成像分析。