每一種細(xì)胞都有自己的“脾氣”，RAW 264.7更是如此，要想養(yǎng)好它，首先我們得充分了解它，比如生長(zhǎng)特點(diǎn)、細(xì)胞形態(tài)、培養(yǎng)體系等，在這基礎(chǔ)上，養(yǎng)好它自然也是“水到渠成”。
 
英文名稱：RAW 264.7
中文名稱：小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞
種屬：鼠源
組織來源：Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤；單核細(xì)胞；巨噬細(xì)胞。
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)（胰酶會(huì)刺激分化）
細(xì)胞形態(tài)：不規(guī)則性（圓形和梭形為主）
傳代比例：1：2-1:3
換液頻率：2-3次/周
培養(yǎng)體系：DMEM（高糖）+10%特級(jí)胎牛血清（逍鵬C04001）+1%P/S
培養(yǎng)條件：5% CO₂ ;37℃
    RAW264.7細(xì)胞具有強(qiáng)吞噬能力，細(xì)胞在吞噬抗原后釋放趨化因子，促使細(xì)胞分化出偽足，因此造成細(xì)胞難消化。RAW 264.7在傳代過程中，不需要使用酶進(jìn)行消化，酶消化會(huì)加速細(xì)胞的分化�，F(xiàn)在比較常見的是吹打傳代，此方法易于操作，也能很好地控制細(xì)胞的分化。

傳代的步驟
第一步：用移液管將培養(yǎng)基中的培養(yǎng)液吸干凈。
第二步：用 PBS 將細(xì)胞層清洗1至2遍。
第三步：用移液管吸取新鮮的培養(yǎng)基輕輕將細(xì)胞吹打下來，并將細(xì)胞吹打成單細(xì)胞懸液，注意吹打的力度，避免過重或者過輕。
第四步：將吹打好的單細(xì)胞懸液進(jìn)行分裝接種。
 

1. 根據(jù)逍鵬的經(jīng)驗(yàn)，RAW264.7三天就可能分化，吹下的難度也大大增加，通過及時(shí)傳代將RAW264.7的分化比例控制在合理的范圍內(nèi)，
2. 該細(xì)胞不建議使用胰酶消化，胰酶會(huì)刺激分化，超過3天不傳代細(xì)胞容易分化。培養(yǎng)時(shí)，存在少量分化細(xì)胞，屬于正常現(xiàn)象。
3. 推薦使用吹打傳代，可以有效控制細(xì)胞分化。
4. 當(dāng)細(xì)胞的密度達(dá)到80%-90%的時(shí)候，最容易吹下；密度較低，不太好吹下來。
5. 接種的密度需要控制好，推薦進(jìn)行高比例的傳代。
6. 推薦使用高質(zhì)量的胎牛血清，血清的質(zhì)量差異會(huì)導(dǎo)致貼壁能力的變化。
7. 隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，細(xì)胞呈現(xiàn)圓形并以疊加的形式生長(zhǎng)。當(dāng)細(xì)胞的密度增加到一個(gè)“臨界點(diǎn)”的時(shí)候，會(huì)有細(xì)胞散落到培養(yǎng)基中，此時(shí)懸浮和貼壁的細(xì)胞會(huì)同時(shí)出現(xiàn)在視野中  。
8. 由于堆積生長(zhǎng)，有些細(xì)胞脫落漂浮，在傳代時(shí)應(yīng)收集起來，離心后細(xì)胞沉淀可以繼續(xù)培養(yǎng)。              
9. 切勿強(qiáng)制吹下所有的細(xì)胞，貼壁較牢或已分化的細(xì)胞可丟棄，就只需接種較容易吹打下來的未分化的細(xì)胞即可。