產(chǎn)品描述：
293 無血清培養(yǎng)基 適用于懸浮培養(yǎng)條件下的 HEK293 細胞(如 293-F,293-T,Expi-293F 等) 的高密度生長和瞬時轉(zhuǎn)染表達。 培養(yǎng)基含有細胞生長所需的全部營養(yǎng)成份， 無需 添加任何添加物即可使用。(注意： 此培養(yǎng)基不包含抗生素以及血清)

產(chǎn)品特點:
瞬時轉(zhuǎn)染專用培養(yǎng)基， 適用于 HEK293 細胞高密度懸浮培養(yǎng)
無蛋白、無動物源、化學(xué)成分限定
即用型完全培養(yǎng)基,無需添加額外成分

基礎(chǔ)參數(shù)：

外觀：	澄清透明紅色液體
滲透壓：	275±15 mOSM
pH:	6.9-7.4
無菌檢測:	無菌
內(nèi)毒素：	<5 EU/mL
儲存條件：	2-8℃，避光
效期：	12 個月
產(chǎn)品用途：	僅用于科學(xué)研究，不適用于人類或動物的診斷和治療

 
產(chǎn)品使用方法：

細胞馴化
1)直接馴化
大部分情況下，培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細胞， 可以直接適應(yīng) FH-293F ，只要按照日常傳代方 式(稀釋)更換培養(yǎng)基即可。

2)漸進式馴化
注意：選用低代次、處于對數(shù)生長期的細胞進行馴化
① 原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細胞并繼續(xù)使用該培養(yǎng)基傳代 2 到 3 次至細胞生長穩(wěn)定，當(dāng)細胞密度達到 2x10 6 cells/ml 后進行傳代，傳代細胞密度控制在 0.5-0.6×10 6 cells/mL，5-10% 血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與 FH-293F 的比例為 75:25；
②將細胞置于 37℃， 5% CO2，轉(zhuǎn)速為 110-175 rpm 的恒溫搖床中進行培養(yǎng)；
③當(dāng)細胞密度 3-4 天后達到 3x10 6  cells/ml 且細胞活率>90%，傳代時 5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與 293培養(yǎng)基 的比例為 50:50，細胞密度控制在 0.5×10 6  cells/   mL。如細胞生長慢，可離心上清， 留 20%條件培養(yǎng)基，加入 80%的 5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其 他無血清培養(yǎng)基與 FH-293F 培養(yǎng)基 比例為 75:25 的混合培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)；
④重復(fù)步驟③逐步增加FH-293F 所占的比例(5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與 FH-293F 的比例為 25:75 至 10:90)直到 100%的 UP1000 無血清培養(yǎng)基；
⑤經(jīng)過在 100%的 FH-293F 無血清培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng)， 傳代后 3-4 天細胞的密度可以達 到 2-3×10 6    cells/mL，細胞活率大于 90%，這說明細胞已經(jīng)完全適應(yīng)了FH-293F 無血清培養(yǎng)基。 之后進行細胞的傳代培養(yǎng)時，細胞的起始密度可以降到 0.3×10 6 cells/mL，一般傳代 2-3 次后 再進行轉(zhuǎn)染實驗。
注意: 一般細胞馴化過程中，前三代細胞的狀態(tài)可能不是很好，但一般從第四代狀態(tài)會有改 善。

細胞傳代
1)取細胞培養(yǎng)樣品，人工或儀器測定細胞密度以及活率；
2)計算傳代所需的細胞用量，建議起始細胞密度為 0.2-0.4×10 6  cells/mL。建議復(fù)蘇的 細胞至少培養(yǎng)兩代后再用于其他用途。傳代培養(yǎng)體積建議為 15-20 mL(100 mL 的培養(yǎng)瓶)或 50-60 mL (250 mL 的培養(yǎng)瓶)；
3)將細胞置于 37℃，5%CO2，轉(zhuǎn)速為 110-175 rpm 的恒溫搖床中進行培養(yǎng)，3-4 天傳代一次。
細胞轉(zhuǎn)染在 FH-293F 無血清培養(yǎng)基中， 采用商業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑(例如 Gibco 293Fectin™ ExpiFectamine™ 293 Transfection Kit )  可以實現(xiàn)對 HEK293 細胞的高效轉(zhuǎn)染。