活細胞成像是在流動條件下細胞培養(yǎng)分析的一種可能的體現(xiàn)。

根據(jù)實驗的持續(xù)時間和溫度要求，有幾種可能的設(shè)置具有不同的優(yōu)點和缺點，本說明中顯示和討論了這些設(shè)置。

1. 無需培養(yǎng)箱即可設(shè)置

設(shè)備：

• 放置在顯微鏡旁邊的 ibidi 泵系統(tǒng)

• 倒置顯微鏡

優(yōu)點：

• 沿灌流管的均勻介質(zhì)溫度。

• 氣泡產(chǎn)生的可能性低。

• 在較長時間內(nèi)非常穩(wěn)定。

• 成本極低且易于操作。

缺點：

• 細胞處于室溫。

• 沒有向細胞培養(yǎng)基供應(yīng) CO2（碳酸鹽緩沖液不起作用）。

適合：

• 可以在室溫下培養(yǎng)的細胞或生物。

• 沒有細胞的實驗。

• 如果細胞耐受溫度下降，則可能用于短期成像。

2. 設(shè)置載物臺頂部培養(yǎng)裝置

設(shè)備：

• 放置在顯微鏡旁邊的 ibidi 泵系統(tǒng)

• ibidi 載物臺頂部培養(yǎng)系統(tǒng)（氣體混合器和溫度控制器）控制舞臺頂部培養(yǎng)室的溫度、二氧化碳和濕度。

• 倒置顯微鏡

優(yōu)點：

• 細胞處于適宜的溫度。

• 成本低。

缺點：

• 沿灌流管的溫度梯度可能有產(chǎn)生氣泡。

• 低 CO2 輸入到培養(yǎng)基中。孵育室（提供 CO2）中的暴露時間非常短。

• 長期不穩(wěn)定。

適合：

• 短期實驗。

3. 設(shè)置載物臺頂部培養(yǎng)裝置和臺式培養(yǎng)箱

設(shè)備：

• ibidi 泵系統(tǒng)

• 臺式培養(yǎng)箱

• ibidi 載物臺頂部培養(yǎng)系統(tǒng)（氣體混合器和溫度控制器）控制載物臺頂部培養(yǎng)室的溫度、二氧化碳和濕度。

• 倒置顯微鏡

優(yōu)點：

• 細胞可以保持在 37°C，因為培養(yǎng)基的冷卻只發(fā)生在從培養(yǎng)箱到載物臺頂部培養(yǎng)的管道中。

• CO2 供應(yīng)提供給儲存器培養(yǎng)基和通道玻片。為獲得最佳 CO2 供應(yīng)，泵回端口連接到小型培養(yǎng)箱的氣體。

• 中長期穩(wěn)定。

缺點：

• 沿灌注管的溫度梯度可能會在長時間內(nèi)會產(chǎn)生氣泡。

適合：

• 細胞需要控溫的長時間培養(yǎng)。

• 更長的時間段，帶有額外的氣泡捕集器。

 

 

 

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