2022年4月15日，施維雅公司（SERVIER）宣布，其胰腺癌治療藥物易安達(dá)（通用名：鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液）獲得中國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）正式批準(zhǔn)上市。
 

一、伊立替康脂質(zhì)體處方信息

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二、傳統(tǒng)伊立替康注射液內(nèi)酯環(huán)易水解

伊立替康最早上市的制劑是鹽酸伊立替康注射液，在實(shí)際使用的過程中，該劑型逐漸暴露出一個(gè)問題：伊立替康的內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)易水解，在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉(zhuǎn)化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低，毒性更強(qiáng)。生理?xiàng)l件（pH 7.4）下，由于血清蛋白優(yōu)先與羧酸鹽絡(luò)合而使平衡偏向活性低的羧酸型，造成有效的內(nèi)酯型比例過低，達(dá)到平衡時(shí)，“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達(dá)90%。
 

三、伊立替康脂質(zhì)體需維持內(nèi)外水相pH差異

q中包裹的伊立替康以有效的內(nèi)酯型為主，這也意味著伊立替康脂質(zhì)體內(nèi)水相pH偏酸性（pH 6左右）。而眾多文獻(xiàn)及Onivyde專利文件實(shí)施例均表明外水相pH在近中性時(shí)更有利于脂質(zhì)的穩(wěn)定，Onivyde專利文件的實(shí)施例表明外水相pH在7.25左右時(shí)脂質(zhì)長(zhǎng)期穩(wěn)定性最佳。這需要伊立替康脂質(zhì)體外水相和內(nèi)水相存在pH差異，同時(shí)外水相偏堿性的緩沖對(duì)不能在長(zhǎng)期儲(chǔ)存中進(jìn)入內(nèi)水相升高內(nèi)水相pH，否則內(nèi)水相中的伊立替康將會(huì)轉(zhuǎn)化為“低效高毒”的羧酸鹽形式。

四、不易穿過脂質(zhì)膜的羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）更適用于伊立替康脂質(zhì)體

而羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作為一種不易穿過生物膜的緩沖對(duì)，可以在穩(wěn)定脂質(zhì)體外水相pH為弱堿性的同時(shí)，不改變內(nèi)水相酸性pH，非常適用于伊立替康脂質(zhì)體。

上述內(nèi)外水相pH差異的問題，在EMA審評(píng)報(bào)告討論部分也有體現(xiàn)。EMA審評(píng)報(bào)告中提到，伊立替康脂質(zhì)體藥物開發(fā)的重點(diǎn)是：

1、選擇用于活性藥物負(fù)載的最佳抗衡離子

2、選擇 DSPC 與脂質(zhì)膜的膽固醇成分的最佳比例，這會(huì)影響其物理性質(zhì)和保留活性物質(zhì)的能力在脂質(zhì)體中

3、選擇脂質(zhì)體雙層的 MPEG-2000-DSPE 組分，其存在于表面提供空間屏障以避免脂質(zhì)體聚集

4、選擇能夠保持最佳pH范圍的適當(dāng)緩沖液輸液用濃縮液

將緩沖液的選擇單列一條，可見其對(duì)伊立替康脂質(zhì)體制劑的重要程度。
 

圖1 伊立替康脂質(zhì)體示意圖
 

圖2 不同外水相pH下伊立替康脂質(zhì)體長(zhǎng)期儲(chǔ)存下溶血-PC的含量變化（樣品6為pH7.25，樣品1為pH6.5）

五、羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）相較于其他緩沖體系較為突出的特點(diǎn)

1、pKa隨溫度變化非常小，buffer的pH值隨溫度漂移很小。

2、性質(zhì)穩(wěn)定，羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）不會(huì)與其他離子發(fā)生相互作用，一方面羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）不會(huì)與其他離子發(fā)生絡(luò)合影響其他離子功能，另外一方面其他離子的存在不會(huì)影響羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）的緩沖能力。

3、細(xì)胞培養(yǎng)基中pH的維持主要依靠培養(yǎng)基中的碳酸氫鹽和5%的CO2共同維持，當(dāng)細(xì)胞處于開放環(huán)境時(shí)，CO2逸散會(huì)導(dǎo)致pH快速上升脫離生理pH范圍，而添加羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）緩沖對(duì)的培養(yǎng)基則不存在這方面問題。

4、羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）不易穿過生物膜，不干擾細(xì)胞內(nèi)的生化反應(yīng)。

六、使用羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）緩沖體系時(shí)的注意事項(xiàng)

1、由于哌嗪基團(tuán)的存在，當(dāng)羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）暴露于光線中時(shí)，會(huì)產(chǎn)生H2O2，這對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞或其它有生物活性的物體產(chǎn)生毒性，同時(shí)對(duì)氧化還原敏感的物質(zhì)不宜共同使用，因此羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作為緩沖液的操作應(yīng)盡量在避光條件下進(jìn)行。

2、羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）在生化領(lǐng)域常見的使用濃度為10-25mM，當(dāng)濃度低于10mM時(shí)緩沖能力較弱，不能起到較好的緩沖效果，當(dāng)濃度較高時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能具有毒害作用。

艾偉拓長(zhǎng)期穩(wěn)定供應(yīng)注射級(jí)海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、羥乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）等生物保護(hù)劑與緩沖鹽，GMP條件生產(chǎn)，中美雙報(bào)，供注射用，超低內(nèi)毒素，DNase& RNase free，符合國(guó)際主流藥典標(biāo)準(zhǔn)，助力重組蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒載體疫苗、脂質(zhì)體、單雙抗、抗體偶聯(lián)藥物等生物制劑生產(chǎn)與中外申報(bào)！

參考資料：

1. onivyde-epar-public-assessment-report_en，Procedure No. EMEA/H/C/004125/0000

2. 專利CN108366965A，穩(wěn)定喜樹堿藥物組合物，易普森生物制藥有限公司