通過(guò)微流控技術(shù)高效、可放大的制備核酸脂質(zhì)納米粒

瀏覽次數(shù)：832　發(fā)布日期：2021-6-30　來(lái)源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

在過(guò)去的一年里，隨著全球范圍內(nèi)眾多研究者們對(duì)mRNA疫苗的廣泛關(guān)注使得mRNA疫苗、核酸藥物等一些原本比較“生僻”的詞匯獲得了更多的曝光度。人們愈發(fā)發(fā)現(xiàn)原本應(yīng)用于罕見(jiàn)病、腫瘤等疾病個(gè)性化治療的核酸藥物所具有的無(wú)限潛能，其眾多優(yōu)點(diǎn)使得越來(lái)越多的人們意識(shí)到了下一個(gè)藥物新時(shí)代可能正悄然走來(lái)。

而目前的mRNA疫苗、核酸藥物多是采用脂質(zhì)納米粒（LNP）來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)mRNA等核酸分子的遞送的，目前輝瑞、Moderna等上市的mRNA新冠疫苗以及最早的RNA類藥物onpattro都是采用了脂質(zhì)納米粒來(lái)遞送各自的核酸藥物，也是目前最受大家認(rèn)可，研究使用最廣泛的遞送體系。與其他遞送材料相比，其包封效果、體內(nèi)外表達(dá)效果、體內(nèi)安全性等多方面都更具優(yōu)勢(shì)。這也使得制備得到良好結(jié)果、可靠的脂質(zhì)納米粒成為了一項(xiàng)重要工作。

目前常用的脂質(zhì)納米粒制備方法主要有薄膜水化法、擠出法、均質(zhì)法等。但是最適合的技術(shù)還是采用微流控混合技術(shù)來(lái)制備核酸脂質(zhì)納米粒，該方法相對(duì)簡(jiǎn)便快速，條件溫和，同時(shí)容易實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)放大。

如圖1所示，通過(guò)不同生產(chǎn)規(guī)模的微流控機(jī)器，可以較好的實(shí)現(xiàn)mRNA-LNP的良好制備，其結(jié)果一致性良好。粒徑結(jié)果合適，且具有極低的PDI值，證實(shí)其分散性較好，并且包封效果可達(dá)90%以上。這些良好的表征結(jié)果正是眾多研究者們所期待看到的數(shù)據(jù)。

圖1. 不同生產(chǎn)規(guī)模的微流控機(jī)器在不同參數(shù)下可以得到一致性良好的結(jié)果

此外，在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中也可以進(jìn)一步驗(yàn)證其效果，如圖2、3所示。通過(guò)制備包載了EPO-mRNA的LNP（注：EPO，Erythropoietin，促紅細(xì)胞生成素），經(jīng)靜脈注射給藥后，檢測(cè)小鼠血清中EPO蛋白表達(dá)量，可發(fā)現(xiàn)相較于空白組明顯的EPO蛋白表達(dá)提升，并且在不同規(guī)模機(jī)器間表達(dá)水平也比較一致。并在7天后，檢測(cè)其血細(xì)胞容積，也可發(fā)現(xiàn)明顯的生理指標(biāo)提升。

111圖2. 給藥EPO-mRNA LNP后小鼠血清內(nèi)EPO蛋白表達(dá)量

圖3. 給藥EPO-mRNA LNP7天后小鼠血細(xì)胞容積量的變化

通過(guò)這些良好的體外表征以及體內(nèi)表達(dá)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，采用微流控技術(shù)制備的mRNA-LNP的確十分可靠，并且在不同生產(chǎn)規(guī)模間實(shí)現(xiàn)了一致性的結(jié)果，讓更多研究者們有理由相信這一技術(shù)在mRNA疫苗、核酸藥物領(lǐng)域的強(qiáng)大實(shí)力。

納米藥物制備系統(tǒng)