疾病動物模型是研究人類疾病發(fā)生發(fā)展機(jī)制、藥物篩選及療效評價(jià)必不可少的工具，好的疾病動物模型可以加快新藥的研發(fā)速度。你還在為不知道選擇什么小鼠模型發(fā)愁嗎？你還在為造模發(fā)愁嗎？賽業(yè)生物新欄目《每周一鼠》，每周更新，為大家講解一個疾病小鼠模型的故事，希望對大家了解不同的疾病小鼠模型有所幫助。今天和大家見面的是飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝小鼠模型。

非酒精性脂肪性肝�。∟AFLD）是一種無過量飲酒史，以肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞脂肪變性和蓄積為特征的臨床病理綜合癥，包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纖維化和肝硬變�？蓮膯渭冃灾�肪肝經(jīng)非酒精性脂肪性肝炎（NASH）發(fā)展為肝纖維化，甚至導(dǎo)致肝硬化、肝細(xì)胞癌（HCC）或肝功能衰竭等終末期肝病。動物模型在闡明非酒精性脂肪肝的病理生理機(jī)制以及新藥的開發(fā)中起著重要的作用。臨床前研究需要根據(jù)研究的特定NAFLD表型使用不同的動物模型。NAFLD和NASH的臨床前動物模型可分為四類：飲食誘導(dǎo)模型、化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)模型、基因編輯模型、復(fù)合模型。今天我們要講的是飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝小鼠模型。

發(fā)病機(jī)制

其主要發(fā)病機(jī)制是營養(yǎng)過剩，食物中脂類、膽固醇和（或）糖類過量，無法完全吸收利用，脂類堆積于肝而引發(fā)脂肪肝，進(jìn)一步出現(xiàn)肝炎性改變及纖維化。

模型特點(diǎn)

☑ 獨(dú)有的多種免疫缺陷為人類造血細(xì)胞的重建提供了一個極好的系統(tǒng)，是HIV-1研究和基因治療的重要模型。

☑ 腫瘤研究的重要工具，可增加腫瘤的發(fā)生率，尤其是淋巴瘤和胸腺瘤。

☑ 移植致死性胸腺淋巴瘤的情況下壽命短。

造模方法

選用SPF級健康雄性 C57BL/6 小鼠 ，對照組采用普通飼料喂養(yǎng)，模型組采用高脂飼料喂養(yǎng)，在第 4、8、12 周進(jìn)行體重及肝指數(shù)檢測，先采血后處死，采血用于生化指標(biāo)檢測，肝組織用甲醛水溶液固定標(biāo)本，制成石蠟切片，采用蘇木精-伊紅染色（HE染色）、油紅O染色，進(jìn)行病理檢測。

模型評價(jià)

光學(xué)顯微鏡下，肝細(xì)胞脂肪變性占1/3以上者視為脂肪肝。

01 外觀及體重

模型組小鼠隨著高脂飼喂延長，活動逐漸減少，精神萎糜，毛發(fā)蓬亂無光澤，體重上升明顯。

圖1. 模型組（60%高脂飼料喂養(yǎng)）和對照組小鼠（普通飼料喂養(yǎng)）體重變化對比。模型組小鼠體重變化顯著高于對照組小鼠。HFD，high-fat diet，高脂飲食。

02 肝臟標(biāo)本觀察

對照組肝臟鮮紅、質(zhì)韌、邊緣銳利；模型組肝臟體積增大、顏色淺淡、有油膩感、肝臟紋路斑駁、邊緣圓鈍。

03 肝功能指標(biāo)

■ 葡萄糖耐受實(shí)驗(yàn)

圖3. 模型組與對照組的葡萄糖耐受實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明經(jīng)60%高脂飼料喂養(yǎng)12周的C57BL/6N小鼠糖耐量顯著降低。注：禁食16小時(shí)，2g/Kg灌胃葡萄糖溶液。

分別檢測對照組、高脂飲食喂養(yǎng)4、8、12 周的小鼠血清的肝功能指標(biāo)：丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、甘油三脂（TG）、總蛋白（TP）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組小鼠血清中總蛋白（TP）、甘油三脂（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）的含量均高于對照組小鼠。

圖4. 血清生化指標(biāo)對比圖。模型組小鼠血清中總蛋白（TP）、葡萄糖（GLB）、甘油三脂（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）的含量均高于對照組小鼠。

04 組織病理學(xué)

對照組肝細(xì)胞呈多邊形，細(xì)胞質(zhì)豐富，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央，小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞無脂肪變性，匯管區(qū)未見炎細(xì)胞浸潤，無其他病理改變。模型組小鼠肝細(xì)胞明顯腫脹，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)明顯可見脂肪空泡，脂滴融合導(dǎo)致細(xì)胞核偏位，甚至細(xì)胞核消失，肝組織內(nèi)可見彌漫分布的大油滴和微小脂滴，并散布全肝，肝細(xì)胞有明顯的炎癥變化 。

圖5. C57BL/6N-對照組-油紅O染色。

圖6. C57BL/6N-高脂誘導(dǎo)4周-油紅O染色。

圖7. C57BL/6N-高脂誘導(dǎo)12周-油紅O染色。