小鼠Elisa試劑盒原理與處理方法
瀏覽次數(shù):226 發(fā)布日期:2021-1-11
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小鼠Elisa試劑盒原理:
采用競爭法測定金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平。用金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板,制成固相載體,實驗時依次在微孔板中加入標本及標準品,并加入HRP標記的OXLDL抗體,標本及標準品中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結(jié)合。反復洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍色,再用硫酸終止反應,轉(zhuǎn)變成黃色。標本中抗體量越多,結(jié)合在固相上的酶標抗體愈少,顏色越淺。顏色的深淺和樣品中的OXLDL含量呈負相關(guān)。采用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),根據(jù)標準曲線,計算測試樣品中OXLDL濃度。
小鼠Elisa試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
特點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、節(jié)省實驗經(jīng)費。
OxLDL ELISA檢測試劑盒結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的AGEs標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的AGEs含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-800ng/ml
4、敏感度: 1.0 ng/ml