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                                                              English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個(gè)人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 首頁(yè) > 技術(shù)文章 > ZDNA結(jié)合蛋白1檢測(cè)試劑盒檢測(cè)未知抗體的間接法步驟

                                                              ZDNA結(jié)合蛋白1檢測(cè)試劑盒檢測(cè)未知抗體的間接法步驟

                                                              瀏覽次數(shù):316 發(fā)布日期:2020-10-13  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
                                                              ZDNA結(jié)合蛋白1檢測(cè)試劑盒檢測(cè)未知抗體的間接法
                                                              1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。
                                                               
                                                              2.次日洗滌3次。
                                                               
                                                              3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。
                                                               
                                                              4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
                                                               
                                                              5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
                                                               
                                                              6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
                                                              雙抗原夾心法的簡(jiǎn)要操作步驟為:
                                                              1)先加入抗原,使抗體固定結(jié)合于載體表面;
                                                              2)再加樣品,使目標(biāo)檢測(cè)抗體形成抗原-抗體復(fù)合物;     美洲四棱線蟲(chóng)PCR試劑盒
                                                              3)加酶標(biāo)抗原;
                                                              4)加入酶促反應(yīng)底物,發(fā)生顯色反應(yīng),顯色的深淺與待測(cè)抗體的量成正比。
                                                              發(fā)布者:上海研生實(shí)業(yè)有限公司
                                                              聯(lián)系電話:021-59963601
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