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                                                              English | 中文版 | 手機(jī)版 企業(yè)登錄 | 個(gè)人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 腰果源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒通用原則

                                                              腰果源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒通用原則

                                                              瀏覽次數(shù):217 發(fā)布日期:2020-3-3  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
                                                              腰果源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒通用原則:
                                                              1,先選擇好探針,然后設(shè)計(jì)引物使其盡可能的靠近于探針。
                                                              2, 擴(kuò)增子的長(zhǎng)度應(yīng)不超過(guò)400bp,理想的能在100-150bp內(nèi),擴(kuò)增片斷約短,有效的擴(kuò)增反應(yīng)就越容易獲得。較短的擴(kuò)增片斷也容易保證分析的一致性
                                                              3, 保持GC含量在20%和80%之間,GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),從而會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增效率的降低,及在SG分析中非特異信號(hào)。
                                                              4, 為了保證效率和重復(fù)性,應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,尤其是G(不能有4個(gè)連續(xù)的G)
                                                              5, 將引物和探針互相進(jìn)行配對(duì)檢測(cè),以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成。
                                                              b),探針設(shè)計(jì)指導(dǎo)
                                                              1,在設(shè)計(jì)引物之前設(shè)計(jì)探針
                                                              2,探針的Tm值應(yīng)在68-70℃之間,如果是目測(cè)探針,則要仔細(xì)審查GC富含區(qū)。
                                                              3,探針的5’端要避免有鳥氨酸,5’G會(huì)有淬滅作用,即使被切割下來(lái)這種淬滅作用也還會(huì)存在
                                                              4,選擇C多于G的鏈作探針,G的含量多于C會(huì)降低反應(yīng)效率,這時(shí)就應(yīng)選擇配對(duì)的另一條鏈作為探針。
                                                              6, 探針應(yīng)盡可能的短,不要超過(guò)30個(gè)bp。
                                                              7, 檢測(cè)探針的DNA折疊和二級(jí)結(jié)構(gòu)。
                                                              全新的熱啟動(dòng)DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,可在PCR反應(yīng)的過(guò)程中抑制非特異擴(kuò)增,從而最大限度地減少非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生,提高熒光定量PCR反應(yīng)的特異性;
                                                                  采用新型的熒光染料EvaGreen,與傳統(tǒng)熒光染料相比,對(duì)PCR反應(yīng)抑制更小,而且熒光信號(hào)更強(qiáng),檢測(cè)靈敏度更高;
                                                                  含有UNG的試劑盒可以防止PCR產(chǎn)物污染體系,進(jìn)而有效防止實(shí)驗(yàn)過(guò)程中PCR產(chǎn)物的交叉污染;
                                                              TaqMan熒光定量PCR試劑盒提供了除引物、探針、模板外的所有實(shí)驗(yàn)所需組分,并配備2×Buffer,可完成不同類型熒光探針的實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng),方便用戶使用;
                                                              發(fā)布者:上海研生實(shí)業(yè)有限公司
                                                              聯(lián)系電話:021-59963601
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