數(shù)字PCR在食品安全檢測的應(yīng)用
瀏覽次數(shù):2175 發(fā)布日期:2019-12-21
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食品安全日益成為一個重要的公共衛(wèi)生問題, 受到社會及國家的高度重視。食源性疾病、食品原料造假、轉(zhuǎn)基因食品等逐漸呈現(xiàn)出普遍增長的趨勢。
食源性疾病是指通過攝食而進(jìn)入人體的有毒有害物質(zhì)等致病因子所造成的疾病。比如常見的食物中毒、腸道傳染病、人畜共患傳染病、寄生蟲病等。食源性疾患的發(fā)病率居各類疾病總發(fā)病率的前列,是當(dāng)前世界上最突出的衛(wèi)生問題。能夠從源頭進(jìn)行預(yù)防以及控制是解決這一問題的重中之重。食品原料造假也是危害國人健康的一大殺手,一些造假原料可能包含致癌物或者其他的有害物質(zhì)。
傳統(tǒng)檢測方法費時費力,難以滿足對食品快速檢測的需求。數(shù)字PCR技術(shù)的出現(xiàn)為食品檢測提供了便利條件以及高效率檢測,可以滿足當(dāng)下食品快速和精確監(jiān)測的需要。
我國首個數(shù)字PCR檢測的國家標(biāo)準(zhǔn)于2017年開始實施,標(biāo)準(zhǔn)號為:GB/T33526-2017,名稱為“轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品數(shù)字PCR檢測方法”,是由國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局和國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會聯(lián)合發(fā)布的。
目前用數(shù)字PCR對食品安全進(jìn)行研究成為了一種趨勢,相對于傳統(tǒng)PCR,數(shù)字PCR具有較好的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性,可實現(xiàn)絕對定量分析,為快速準(zhǔn)確地進(jìn)行食品安全檢測提供了一種嶄新的技術(shù)平臺。
數(shù)字PCR檢測金黃色葡萄球菌結(jié)果重復(fù)性較好。
數(shù)字PCR(Digital PCR-dPCR)技術(shù)是一種新的核酸檢測和定量方法,為第三代PCR,可以實現(xiàn)對起始核酸樣品的絕對定量。如Naica 全自動微滴芯片式數(shù)字PCR技術(shù)所展現(xiàn)的那樣,在反應(yīng)體系中加入熒光染料的同時將反應(yīng)體系進(jìn)行分區(qū),且分區(qū)多達(dá)30000個微滴,實現(xiàn)了單分子模板的擴(kuò)增,最后通過陽性反應(yīng)器數(shù)出目標(biāo)序列的拷貝數(shù),可以對低拷貝基因進(jìn)行檢測,彌補了熒光PCR的不足。數(shù)字PCR平臺憑借其優(yōu)勢已應(yīng)用在腫瘤學(xué)研究、NIPT研究、液態(tài)活檢、細(xì)胞治療質(zhì)控、用藥及移植監(jiān)控、致病微生物檢測、食品安全、環(huán)境檢測、核酸類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定量等方面。
2016年,法國Stilla Technologies推出Naica創(chuàng)新型微滴芯片式數(shù)字PCR系統(tǒng),直接在芯片上生成微滴,該系統(tǒng)目前為數(shù)字PCR領(lǐng)域的佼佼者。
☼ 可產(chǎn)生的有效微滴數(shù)高達(dá)30000,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他品牌。
☼ 3熒光通道,可使用多種熒光染料來標(biāo)記不同的要檢測的靶基因。
☼ 操作簡便,一步上樣,從加樣到結(jié)果分析僅需兩個半小時。
可視化質(zhì)控:
微滴追溯:
顯著區(qū)分陰陽性:
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