mRNA原位雜交試劑盒說明書
mRNA原位雜交試劑盒
原位雜交成套試劑盒，由于采用高效標記的探針和敏感性加強型原位雜交檢測試劑盒；使得原位雜交實驗的成功率大大提高，操作也更簡便。但仍有一些問題是引起注意的；
1、有條件應(yīng)盡可能用新鮮標本，并及時進行固定。固定液為4%多聚甲醛(0.1MPBS，PH7.0-7.6)含0.1%DEPC。因為mRNA類基因容易降解。
2、標本的消化對原位雜交比較重要，適當?shù)南瘜⑹拱谢虺浞直┞叮黾犹结樀慕佑|性。但過度的消化將使標本明顯減薄乃至消失。不同的標本對消化的敏感性不同。常用的消化酶有蛋白酶K和胃蛋白酶。大量標本實驗前，應(yīng)仔細摸索最佳的消化條件。蛋白酶K的消化條件為10ug/mL(0.1M TBS,PH7.2-7.6)，37℃消化1-5分鐘。
3、雜交后的洗滌對信號/背景/強度有密切關(guān)系，洗滌時間越短，信號越強，背景也越高；洗滌時間超長，信號越低。適當?shù)南礈鞎r間會獲得理想的信號強度和可以忽略的背景染色。mRNA原位雜交試劑盒
原位雜交成套試劑盒，由于采用高效標記的探針和敏感性加強型原位雜交檢測試劑盒；使得原位雜交實驗的成功率大大提高，操作也更簡便。但仍有一些問題是引起注意的；
1、有條件應(yīng)盡可能用新鮮標本，并及時進行固定。固定液為4%多聚甲醛(0.1MPBS，PH7.0-7.6)含0.1%DEPC。因為mRNA類基因容易降解。
2、標本的消化對原位雜交比較重要，適當?shù)南瘜⑹拱谢虺浞直┞叮黾犹结樀慕佑|性。但過度的消化將使標本明顯減薄乃至消失。不同的標本對消化的敏感性不同。常用的消化酶有蛋白酶K和胃蛋白酶。大量標本實驗前，應(yīng)仔細摸索最佳的消化條件。蛋白酶K的消化條件為10ug/mL(0.1M TBS,PH7.2-7.6)，37℃消化1-5分鐘。
3、雜交后的洗滌對信號/背景/強度有密切關(guān)系，洗滌時間越短，信號越強，背景也越高；洗滌時間超長，信號越低。適當?shù)南礈鞎r間會獲得理想的信號強度和可以忽略的背景染色。mRNA原位雜交試劑盒
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