牛胰島素樣生長因子結合蛋白-1檢測試劑盒標本的采集及保存
1、血清：全血標本請于室溫放置2 小時或4 過夜后于1000 g 離心20 分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20 或-80 保存，但應避免反復凍融。
2、血漿：可用EDTA 或肝素作為抗凝劑，標本采集后30 分鐘內于1000 g 離心15 分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20 或-80 保存，但應避免反復凍融。
3、其它生物標本：請1000 g 離心20 分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20 或-80 保存，但應避免反復凍融。
注：以上標本均應密封保存，4 保存應小于1 周，-20 不應超過1 個月，-80 不應超過2 個月；標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
操作步驟
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫，試劑不能直接在37 溶解；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1、加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100 ，余孔分別加標準品或待測樣品100 ，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37 溫育2 小時。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2、棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A 工作液100 （臨用前配制），酶標板加上覆膜，37 溫育1 小時。
3、棄去孔內液體，甩干，洗板3 次，每次浸泡1-2 分鐘，大約400 /每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
4、每孔加檢測溶液B 工作液（臨用前配制）100 ，加上覆膜，37 溫育1 小時。
5、棄去孔內液體，甩干，洗板5 次，方法同步驟3。
6、每孔加底物溶液90 ，酶標板加上覆膜37 避光顯色（反應時間控制在15-30 分鐘，當標準孔的前3-4 孔有明顯的梯度藍色，后3-4 孔梯度不明顯時，即可終止）。
7、每孔加終止溶液50 ，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
8、立即用酶標儀在450nm 波長測量各孔的光密度（OD 值）。