免疫組織化學(xué)方法成功與否關(guān)鍵在于抗原決定簇的保存和暴露.組織經(jīng)甲醛固定.甲醛的醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián),使決定簇的構(gòu)像改變.從而影響檢測(cè)蛋白表達(dá).要充分暴露抗原決定簇，通常用到抗原修復(fù)鍋Antigen Retriever。強(qiáng)烈推薦EMS最具有競(jìng)爭(zhēng)力的一款產(chǎn)品，適于甲醛固定的組織，經(jīng)石蠟包埋后進(jìn)行免疫染色前的處理，配合特別的抗原修復(fù)緩沖液確保你得到最搞質(zhì)量的免疫染色效果。

· 一次可以在6中不同緩沖液中運(yùn)行，進(jìn)行抗原暴露

· 僅暴露抗原決定簇，不損傷組織的形態(tài)

· 實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定，結(jié)果重現(xiàn)性高

· 系列的玻片在獨(dú)立環(huán)境中經(jīng)過(guò)處理

 

抗原修復(fù)鍋怎樣工作？

看上去，抗原修復(fù)鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能獨(dú)特的“高壓鍋”，主要用于抗原暴露的工作，主要的工作原理也是裝玻片的幾個(gè)分室可以達(dá)到高溫(>120°C)高壓。靈敏的傳感控制器來(lái)保持一定的溫度和壓力及一定的時(shí)間，這些工作參數(shù)都是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的科學(xué)實(shí)驗(yàn)得到的數(shù)據(jù)。當(dāng)達(dá)到需要的溫度，抗原修復(fù)鍋會(huì)在該溫度下保持幾分鐘，之后鍋內(nèi)玻片被冷卻2個(gè)多小時(shí)，特殊設(shè)材質(zhì)的內(nèi)鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。 

 

誰(shuí)是受益人？

研究病理的實(shí)驗(yàn)室，那里需要高質(zhì)量染色照片（用來(lái)發(fā)表）的

缺乏技術(shù)人員的實(shí)驗(yàn)室，學(xué)生和博士后均可以處理玻片進(jìn)行組織染色，且不需要很多時(shí)間來(lái)摸索

小型病理實(shí)驗(yàn)室，每天處理的玻片數(shù)量有限

樣本昂貴稀有，或如組織芯片，或如獨(dú)一無(wú)二的組織樣本，利用抗原修復(fù)鍋，簡(jiǎn)單可靠

 

怎樣選擇一種緩沖液（Buffer）？

如果你已經(jīng)知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復(fù)，那么用抗原修復(fù)鍋時(shí)，這種緩沖液也同時(shí)適用的機(jī)會(huì)很大。我們提供四種即用型緩沖液R-Buffer A/B/C/U，同時(shí)也提供同種更加溫和的組織處理緩沖液，我們稱(chēng)之G系列，R-Buffer AG/BG/CG/UG。

 

選擇Buffer，主要考慮以下兩點(diǎn)：

1.  抗原的自然特性以及所選擇的抗體

抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開(kāi)始的時(shí)候選擇抗原表達(dá)環(huán)境的最適Buffer。以下是經(jīng)驗(yàn)供大家參考：

Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-related) R: Buffer A (or AG).

Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

 

2.  固定液以及固定程度

 

建議的組織切片的抗原修復(fù)處理是一種針對(duì)普通的適化狀態(tài)切片。如果用來(lái)切片的組織塊沒(méi)有充分固定，或者過(guò)固定（留在福爾馬林溶液中時(shí)間過(guò)長(zhǎng)），或者用了其它的固定液，那么，處理組織切片的流程方案需要重新修訂，最便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液。對(duì)于過(guò)固定的材料一般推薦用U buffer或者在同一Buffer里面增加循環(huán)

 

抗原修復(fù)鍋技術(shù)參數(shù)：

Heigh	335 mm
Capacity	9 litres
Max. Instrument length	228 mm
Width.	340 mm
Net Weight	4.5 kilos
Internal chamber Dimensions (d/h)	210/230 mm
Max. Load Weight	3.0kg
Max. Single Fault Temperature	133.3°C

使用抗原修復(fù)鍋進(jìn)行染色的效果示例

1.福爾馬林固定，石蠟包埋，人乙狀結(jié)腸組織切片，經(jīng)抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原暴露，R-Buffer C (pH 6.0)組織玻片降溫過(guò)夜，抗體MIB-1，抗原Ki-67，R-Detect HRP系統(tǒng)染色

2. 福爾馬林固定，石蠟包埋，人乙狀結(jié)腸組織切片，經(jīng)抗原修復(fù)鍋進(jìn)行抗原暴露，R-Buffer A (pH 8.1)組織玻片降溫過(guò)夜，抗體#4B11，抗原CD8 (cell membrane)，R-Detect HRP系統(tǒng)染色.

 

儀器及配件的選購(gòu)：

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格
62700-20	Retriever 220 volt （內(nèi)含3個(gè)chamber）	1
62705-01	Slide Chamber	3/pk
62705-02	Chamber Rack	1
62705-03	Lifting Device	1
62705-05	Cord Set (Europe)	1

緩沖液的選購(gòu)：

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格
62706-10	R-Buffer A (10x)	250 ml
62706-11	R-Buffer B (10x)	250 ml
62706-12	R-Buffer C (10x)	250 ml
62706-13	R-Buffer U (10x)	250 ml
62707-10	R-Buffer AG (2x)	250 ml
62707-11	R-Buffer BG (2x)	250 ml
62707-12	R-Buffer CG (2x)	250 ml
62707-13	R-Buffer UG (2x)	250 ml