西美杰針對病毒包裝五大環(huán)節(jié)的解決方案
西美杰獨家病毒包裝方案：五大流程，一個對策！
不論是細胞治療還是基因治療都離不開病毒載體。目前使用最多的病毒載體類型包括：腺相關(guān)病毒（AAV）、慢病毒（Lv）、逆轉(zhuǎn)錄病毒（Rv）和腺病毒（Adv）等，這些常用病毒載體特性如下圖所示：
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特征 |
慢病毒 Lentivirus |
逆轉(zhuǎn)錄病毒 Retrovirus |
腺相關(guān)病毒 AAV |
腺病毒 ADV |
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基因表達 |
穩(wěn)轉(zhuǎn)/瞬轉(zhuǎn) |
穩(wěn)轉(zhuǎn) |
瞬轉(zhuǎn) |
瞬轉(zhuǎn) |
|
是否能感染可分裂的細胞 |
是 |
是 |
是 |
是 |
|
是否能感染不分裂的細胞 |
是 |
是 |
否 |
否 |
|
是否能整合到靶細胞基因組 |
是 |
是 |
否 |
否 |
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靶細胞的免疫反應(yīng) |
低 |
較低 |
非常低 |
高 |
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病毒滴度 |
+++ |
++ |
+++ |
++++ |
|
轉(zhuǎn)染效率 |
+++ |
++ |
+++ |
++++ |
因此在選擇病毒載體時，除了要考慮載體自身特征之外，如何包裝并獲取高滴度高活性的病毒載體對后續(xù)實驗至關(guān)重要，針對病毒載體制備5大環(huán)節(jié)，小美為您推薦如下解決方案↓
1. 病毒載體包裝質(zhì)粒系統(tǒng)
西美杰代理的美國Cell Biolabs公司推出的病毒包裝系統(tǒng)可滿足多種重組病毒包裝需求，包括四大類型病毒包裝質(zhì)粒AAV Helper Free System、ViraSafe™ Lentivirus Expression Complete Systems、Platinum Retroviral Expression Systems以及RAPAd® Adenoviral Expression Systems等。更多病毒包裝質(zhì)粒系統(tǒng)介紹請點這里。
2. 病毒包裝試劑
A. 病毒包裝專用轉(zhuǎn)染試劑
西美杰代理的美國Mirus公司新推出的病毒包裝專用轉(zhuǎn)染試劑TransIT®-VirusGEN™與TransIT®-Lenti系列，專門針對AAV和Lentivirus設(shè)計，相比傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方法能獲得更高的轉(zhuǎn)染效率和病毒滴度，無動物源成分且兼容多種病毒包裝系統(tǒng)及不同細胞系類型。
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品名 |
貨號 |
規(guī)格 |
適用病毒類型 |
|
TransIT®-VirusGEN™ Transfection Reagent |
MIR 6703 |
0.3/0.75/1.5mL |
AAV & Lentivirus |
|
TransIT®-Lenti Transfection Reagent |
MIR 6603 |
0.3/0.75/1.5mL |
Lentivirus |
B. Lv/Rv包裝效率增強劑Lentivirus/Retrovirus 10X Titer-Up
西美杰獨家代理的101Bio品牌Lentivirus/Retrovirus 10X Titer-Up用于重組慢病毒或逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝過程，可促進病毒基因組轉(zhuǎn)錄和RNA穩(wěn)定，使轉(zhuǎn)染效率提高10倍左右。
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品名 |
貨號 |
規(guī)格 |
適用病毒類型 |
|
Lentivirus 10X Titer-Up |
P906 |
1 mL |
Lentivirus |
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Retrovirus 10X Titer-Up |
P909 |
1 mL |
Retrovirus |
C. AAV/Adv病毒釋放液Virus-High® AAV/ADV Release Solution
西美杰獨家代理的101Bio品牌Virus-High® AAV/ADV Release Solution是一款無需反復(fù)凍融，即可從細胞中快速高效收獲AAV/Adv病毒以及其他非分泌型無囊膜病毒的試劑。
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品名 |
貨號 |
規(guī)格 |
適用病毒類型 |
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Virus-High® AAV / Adv Release Solution |
P900 |
10 mL |
AAV & Adv |
3. 高效快速病毒濃縮試劑與純化試劑盒
西美杰獨家代理的美國Cali-bio和Cell Biolabs品牌專門針對病毒載體設(shè)計的高效重組病毒濃縮純化試劑（盒），在獲得重組病毒高回收率的同時大大簡化操作流程，無需超速離心設(shè)備，是中小規(guī)模樣本純化的首選方案。
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重組病毒類型 |
品名 |
貨號 |
特點 |
|
逆轉(zhuǎn)錄病毒 （Retrovirus） |
Retrovirus Concentration Solution（5×） 逆轉(zhuǎn)錄病毒濃縮試劑 |
CB300904 |
無需超速離心； 1小時內(nèi)病毒濃縮10-100倍； 濃縮后病毒適用于各種細胞； |
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慢病毒 （Lentivirus） |
Lentivirus Concentration Solution（5×） 慢病毒濃縮試劑 |
CB300905 | |
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ViraBind™ Lentivirus Purification Kit |
VPK-104 |
操作時間< 2h，無需超速離心； | |
|
回收率>90%，純化效果與CsCl方法相當(dāng) | |||
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腺相關(guān)病毒 （AAV） |
ViraBind™ AAV Purification Kit （適用樣本量為2個10cm皿或1個15cm皿收獲的上清） |
VPK-140 |
適用于純化AAV-2與AAV-DJ； 操作時間約3h； |
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ViraBind™ AAV Purification Mega Kit （一次處理樣本量可達10個15cm皿收獲的上清） |
VPK-141 |
獲得AAV純度>95%，回收率>60% | |
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腺病毒 （ADV） |
ViraBind™ Adenovirus Miniprep Kit （適用樣本量為1個T75瓶或1個10cm皿收獲的上清） |
VPK-099 |
采用特殊濾膜和離心柱； 操作時間約30min，無需超速離心； |
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ViraBind™ Adenovirus Purification Kit （適用樣本量約為4個T75瓶收獲的上清） |
VPK-100 |
回收率>90%，純化效果與CsCl方法相當(dāng) |
4. 病毒滴度檢測試劑盒
精確測定重組病毒滴度是提高下游實驗可控性，重復(fù)性和準確性的前提，西美杰代理的Cell Biolabs品牌針對不同病毒載體的特性分別設(shè)計的了多種滴度測定試劑盒，并且兼容了高效和精確的測定方法。
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重組病毒類型 |
品名 |
貨號 |
特點 |
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慢病毒 （Lentivirus） |
Lentivirus Rapid Quantitation Kit |
VPK-112 |
快速定量，操作過程45-60min； 熒光法檢測病毒核酸濃度定量病毒滴度，純化前或純化后樣品都可檢測； 靈敏度：1010個病毒粒子/mL或100ul純化前上清 |
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Lentivirus-Associated p24 ELISA Kit |
VPK-107 |
專利Pull-down技術(shù)分離出病毒相關(guān)P24蛋白，去除游離P24蛋白； ELISA方法精確定量有活性的重組慢病毒滴度，避免傳統(tǒng)方法檢測總P24蛋白導(dǎo)致的誤差 | |
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Traditional p24 ELISA Kit |
VPK-108-H |
ELISA方法檢測總P24蛋白定量慢病毒滴度 | |
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逆轉(zhuǎn)錄病毒 （Retrovirus） |
QuickTiter™ Retrovirus Quantitation Kit |
VPK-120 |
快速定量，操作過程45-60min； 熒光法檢測病毒核酸濃度定量病毒滴度，純化前或純化后樣品都可檢測； 靈敏度：1.5×109個病毒粒子/mL或100ul純化前上清 |
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腺相關(guān)病毒 （AAV） |
QuickTiter™ AAV Quantitation Kit |
VPK-145 |
快速定量，操作過程<2h； 熒光法檢測病毒核酸濃度定量病毒滴度； 靈敏度：純化前AAV可達109 GC/mL，對于純化后AAV可達5×1010 GC/mL |
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腺病毒 （ADV） |
QuickTiter™ Adenovirus Quantitation Kit |
VPK-106 |
快速定量，操作過程45-60min； 熒光法檢測病毒核酸濃度定量病毒滴度，純化前或純化后樣品都可檢測； 靈敏度：1010個病毒粒子/mL或100ul純化前上清 |
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QuickTiter™ Adenovirus Titer Immunoassay Kit |
VPK-109 |
無需空斑形成實驗，避免復(fù)雜的鋪瓊脂步驟，操作更簡便； 傳統(tǒng)方法10天才可完成的實驗，用該試劑盒僅需2.5天，有ELISA和ICC兩種方法供選擇； | |
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QuickTiter™ Adenovirus Titer ELISA Kit |
VPK-110 |
可用于所有41個血清型的腺病毒 |
5. 病毒感染增強試劑
西美杰代理的Cell Biolabs品牌還針對不同病毒載體研發(fā)了專用促病毒感染試劑，能顯著提高病毒對靶細胞的感染，進而提高基因表達效率。
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品名 |
貨號 |
規(guī)格 |
特點 |
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ViraDuctin™ Lentivirus Transduction Kit |
LTV-200 |
40 次 |
復(fù)合型試劑能與慢病毒或逆轉(zhuǎn)率病毒形成復(fù)合物，與Polybrene®相比病毒感染效率可提高2-6倍，適用于原代細胞和干細胞 |
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LTV-201 |
200次 | ||
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ViraDuctin™ Retrovirus Transduction Kit |
RV-200 |
40次 | |
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RV-201 |
200次 | ||
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ViraDuctin™ AAV Transduction Kit |
AAV-200 |
10次 |
有效提高重組AAV在多種細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)染效率，包括傳統(tǒng)方法轉(zhuǎn)導(dǎo)效率低的細胞和非分裂細胞，如原代細胞和干細胞。該試劑使用方便，僅需2h，是AAV轉(zhuǎn)染非分裂細胞的首選。 |
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AAV-201 |
50次 | ||
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ViraDuctin™ Adenovirus Transduction Reagent |
AD-200 |
10次 |
該試劑讓重組腺病毒感染不依賴于細胞的CAR（柯薩奇病毒-腺病毒受體）水平，可顯著提高病毒感染低CAR或無CAR表達的細胞，如原代細胞或干細胞，還可提高轉(zhuǎn)入基因的表達效率 |
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AD-201 |
50次 |
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