上海凈信高通量組織研磨儀研磨腫瘤組織提取RNA
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/SPAN>
研磨破碎腫瘤組織細(xì)胞(如胰腺、肺、肝等器官的腫瘤組織),后續(xù)提取其RNA。
實(shí)驗(yàn)原理
通過研磨珠撞擊腫瘤組織細(xì)胞,使其細(xì)胞膜破裂,其內(nèi)的RNA暴露。
實(shí)驗(yàn)材料和器具
樣品:腫瘤組織細(xì)胞
儀器:高通量組織研磨儀(上海凈信,Tissuelyser-48)
耗材:離心管(上海凈信,2ml),研磨珠(上海凈信,3mm)
實(shí)驗(yàn)步驟
1.取組織塊解凍,用生理鹽水洗去血污,剪取約0.5g組織,剪小放入2.0ml離心管中;
2.加入一粒6MM的研磨珠,(如果用1.5ML的離心管,加入三或五粒的3MM的研磨珠),加入0.45ml TES混勻,再加入50ul SDS(10%),5.0ul蛋白酶K(20mg/ml),充分混勻;
3.離心管放入研磨機(jī)中,設(shè)置參數(shù)65hz,60秒,程序結(jié)束即可得到破碎原液;
4.完成后續(xù)RNA提取步驟。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖1 胰腺腫瘤組織RNA提取