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LB培養(yǎng)基的配制實(shí)驗(yàn)步驟

瀏覽次數(shù):3792 發(fā)布日期:2015-5-15  來(lái)源:上海北諾生物科技有限公司

實(shí)驗(yàn)步驟

1. LB 培養(yǎng)基
Tryptone
10 g
Yeast Extract
5 g
NaCl
10 g
加水至 1000 mL(pH 7.2,固體培養(yǎng)基加 1.8% 瓊脂粉)。
2. LB 抗性篩選培養(yǎng)基
待滅菌后的 LB 固體培養(yǎng)基溫度降至 50℃左右,加入抗生素儲(chǔ)存液至終濃度 50 µg/mL,即每毫升培養(yǎng)基加抗生素儲(chǔ)存液 1 µL,搖勻后,倒平板。
液體 LB 抗性篩選培養(yǎng)基,在完全冷卻后加入抗生素,加入的量與固體培養(yǎng)基相同。
3. LB/Amp/IPTG/X-gal 培養(yǎng)基
在含 100 µg/mL Amp 的 LB 瓊脂平板上加入 40 µL X-gal 貯存液和 40 µL IPTG 溶液,用無(wú)菌玻璃涂布器把溶液均勻涂布于整個(gè)平板表面,超凈工作臺(tái)上吹干后備用。
4. SOC 液體培養(yǎng)基
Tryptone
20 g
Yeast Extract
5 g
NaCl
0.5 g
加入 950 mL 水,完全溶解后加入 250 mmol/L 的 KCl 溶液 10 mL,用NaOH 溶液(5 mmol/L)調(diào)節(jié) pH 值至 7.0,雙蒸水定容至 1000 mL 后高壓滅菌。滅菌后降溫至 60℃以下,加入 7.2 mL 50% 葡萄糖溶液。使用前加入5 mL 經(jīng)滅菌的 2 mol/L 的 MgCl2 溶液。
來(lái)源:上海北諾生物科技有限公司
聯(lián)系電話:021-57730393,15800960770
E-mail:beinuobio@163.com

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