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如何用TL2010S組織破碎器快速高效破碎動物心肺組織樣品

瀏覽次數(shù):3931 發(fā)布日期:2015-1-29  來源:www.dhsbio.com
第四軍醫(yī)大學某實驗室近期解決了一件煩心事。他們在做藥物代謝原理分析實驗時,需要對采集到的大量的受試兔子心臟肌肉組織和肺部組織樣品進行破碎處理,用于后續(xù)做不同方法的對比分析。然而,使用實驗室現(xiàn)有的組織勻漿器,不僅一次處理通量少、易污染且難清洗,處理后的樣品還不夠均勻細致,基本達不到做后續(xù)分析實驗的要求。為此,實驗項目一度無法大規(guī)模開展。201411月,實驗室人員聯(lián)系鼎昊源科技,申請試用TL2010S組織破碎器(又稱TL2010S中通量組織研磨破碎器)進行樣品破碎處理,在鼎昊源科技工程師現(xiàn)場協(xié)助下,終于摸索出批量快速高效破碎心肺組織樣品的好方法,主要有以下操作要點:

1.將采集后的心肺組織粗樣分別置入5ml破碎器研磨管(或普通圓底離心管),每管置入量約占單管1/3體積為最佳;

2.在每個離心管中置入3顆直徑8mm的不銹鋼研磨珠,蓋好管蓋,將離心管對稱裝入適配器中,上搖臂固定;

3.TL2010S組織破碎器參數(shù)設置為轉速1800rpm、每研磨60秒自動停止研磨10S且循環(huán)5次(即間歇研磨5分鐘);

研磨程序完全停止后,取出并打開離心管,破碎后的樣品狀態(tài)如下圖2現(xiàn)場照片所示,可見樣品破碎得非常均勻細致:

TL2010S組織破碎器實機照片

破碎心肺組織的效果現(xiàn)場實拍(使用普通5ml離心管)

1TL2010S組織破碎器實機照片

2:破碎心肺組織的效果現(xiàn)場實拍(使用的是普通5ml離心管)



為什么實驗室人員之前使用常規(guī)組織勻漿器無法實現(xiàn)較好的破碎處理呢?


鼎昊源科技通過大量樣品破碎測試發(fā)現(xiàn),動物組織類樣品本身相比其他樣品更難破碎,特別是一些結締組織、心臟組織、肺部組織,因為韌性較大,一般很難用普通手工研磨或者常規(guī)組織勻漿器徹底破碎,所以也就無法滿足后續(xù)精細的實驗要求。而使用
TL2010S組織破碎器,可針對不同體積和數(shù)量的樣品,搭配不同規(guī)格的離心管及適配器,進行多樣品的同時高速破碎。不僅操作靈活方便,還同時避免了樣品間的交叉污染,省去了清洗儀器的繁瑣工作。


為什么要選用5ml破碎器研磨管(或普通圓底離心管)呢?


我們知道
TL2010S組織破碎器還可搭配多個1.5/2.0ml離心管進行研磨,但在本實驗中,這種規(guī)格的離心管相對于要大量破碎的粗樣來說容量偏小,而且可容納的研磨珠也較小,所以撞擊力度有限,達不到最佳的研磨效果。而使用5ml破碎器研磨管(或普通圓底離心管),單管置入的樣品量不僅增加了,還可置入更大尺寸的研磨珠產(chǎn)生更大的撞擊力度,從而獲得更好的研磨效果。


為什么要設置間歇研磨破碎呢?


間歇研磨是
TL2010S組織破碎器一個特色功能之一。設置一定的間歇時間,可以有效減少樣品在持續(xù)高速研磨破碎中因快速升溫而發(fā)生降解的情況,為后續(xù)實驗的順利進行提供保障。如果配合液氮低溫處理,可以更有效地降低樣品溫升,利于RNA提取等對溫度敏感的實驗。


最后將快速高效破碎心肺組織的好方法總結成如下公式供大家參考:


快速高效破碎心肺組織的好方法=
TL2010S組織破碎器+5ml離心管及適配器+每管3顆直徑8mm研磨鋼珠+5分鐘間歇研磨(每60秒歇10秒,循環(huán)5次)

來源:鼎昊源(天津)生物科技有限公司
聯(lián)系電話:010-58650065
E-mail:chenyajing@herosbio.com

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