化學(xué)發(fā)光成為大多數(shù)蛋白實(shí)驗(yàn)室首選的檢測方法，其這些優(yōu)點(diǎn)如下：1、使用化學(xué)發(fā)光可以通過多次曝光獲得最好的成像結(jié)果；2、可以將檢測試劑完全去除，再對(duì)其他目的蛋白進(jìn)行檢測并成像，或?qū)�檢測條件進(jìn)行優(yōu)化；3、具有很寬的線性響應(yīng)范圍，從而可以檢測并定量很寬濃度范圍的蛋白質(zhì)；4、化學(xué)發(fā)光在所有的檢測方法中具有最高的靈敏度。

   

在化學(xué)發(fā)光分析中，如果再加入適當(dāng)?shù)脑鰪?qiáng)劑，則靈敏度提高且發(fā)光時(shí)間延長，可改善測定的重現(xiàn)性。實(shí)驗(yàn)證明，對(duì)位酚類衍生物的發(fā)光增強(qiáng)作用明顯，其發(fā)光效率可上升幾十倍，發(fā)光時(shí)間也獲得有效延長。

  

吖啶酯或吖啶磺酰胺類化合物應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA），通常采用的體系是Acridinium ester/ H₂O₂系統(tǒng)。即用吖啶酯或吖啶磺酰胺標(biāo)記抗體或抗原，用HNO₃+H₂O₂和NaOH作發(fā)光啟動(dòng)試劑。有些在發(fā)光啟動(dòng)試劑中加入Triton X-100，CTAC，Tween-20等表面活性劑以增強(qiáng)發(fā)光。

    

自然中廣泛分布著生物發(fā)光有機(jī)體，其中包括細(xì)菌、真菌、魚、昆蟲等。在這些生物發(fā)光有機(jī)體中催化生物發(fā)光反應(yīng)的各種酶都稱之為熒光素酶（Luciferases），底物則命名為熒光素（Luciferin）。D-熒光素（D-luciferin)是生物冷光檢查使用最廣泛的物質(zhì)，是熒光素檢測試劑盒的核心成份，廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)藥、食品、衛(wèi)生、環(huán)境等領(lǐng)域。D-熒光素、D-熒光素鉀鹽、D-熒光素鈉鹽，作為Luciferase的作用底物，常用于以下實(shí)驗(yàn)：

 1．報(bào)告基因分析

 2．動(dòng)物活體成像(In vivo imaging) 和細(xì)胞體外分析（In vitro imaging）

 3．三磷酸腺苷（ATP）測定

 4．其它 luciferase 及其基因相關(guān)的分析和研究工作

   

熒光素類和羅丹明類是生物技術(shù)中最常用的標(biāo)記染料，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)和核酸的檢測分析中，人們對(duì)其結(jié)構(gòu)和性能已經(jīng)有了深入的了解。菁染料是一種比較特殊的染料，利用它摩爾消光系數(shù)高、光譜范圍廣且光量子產(chǎn)率高等特性，應(yīng)用于生物大分子熒光標(biāo)記。菁染料主要用于標(biāo)記核酸。菁染料是一種比較特殊的染料，利用它摩爾消光系數(shù)高、光譜范圍廣且光量子產(chǎn)率高等特性，應(yīng)用于生物大分子熒光標(biāo)記。菁染料主要用于標(biāo)記核酸。