Cell-Based ELISA（基于細(xì)胞的 ELISA）是一種全新的ELISA技術(shù)，有兩個(gè)最突出的優(yōu)點(diǎn)：

 

1.1不需要抽提蛋白、包被微孔板：細(xì)胞直接在微孔板里培養(yǎng)，待檢測(cè)的時(shí)候，將細(xì)胞固定在微孔板上并進(jìn)行通透處理即可。這樣就避免了抽提蛋白時(shí)，由于客觀和主觀上引起樣品的損失而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果在一定程度上偏離了實(shí)際情況。同時(shí)不用包被微孔板，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)流程，有助于提高效率�？蒲腥藛T在一個(gè) 96 孔酶聯(lián)板上，便能檢測(cè)目標(biāo)細(xì)胞蛋白經(jīng)刺激或抑制作用后的表現(xiàn)。由于省去抽提蛋白和裂解細(xì)胞的步驟，樣本的損失也能降到最低，比起其他普通的 ELISA 測(cè)定方法，這項(xiàng)全新的 ELISA 技術(shù)能更快速、更方便地一次檢測(cè)大量的細(xì)胞內(nèi)蛋白。

 

1.2  可同時(shí)檢測(cè)兩種不同蛋白：封閉后加入兩種抗不同蛋白且來(lái)源于不同宿主的一抗，然后再加入不同的二抗，加入兩種熒光底物，檢測(cè)兩個(gè)波長(zhǎng)。同時(shí)檢測(cè)兩種蛋白的好處是顯而易見(jiàn)的，可以減少工作量，此外還可以滿足一些特殊的實(shí)驗(yàn)需要，例如，需要測(cè)定某個(gè)蛋白的磷酸化比例，就需要測(cè)定磷酸化蛋白的數(shù)量和總蛋白的數(shù)量，這兩個(gè)測(cè)定在同一次實(shí)驗(yàn)進(jìn)行，有助于消除實(shí)驗(yàn)誤差，得到更為精確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

 

某些公司發(fā)展了雙通道Cell-Based ELISA技術(shù)；

雙通道與單通道Cell-based ELISA比較：

雙通道cell-based ELISA，顧名思義，即一次可以同時(shí)檢測(cè)兩種目的蛋白，R&D Systems提供的Cell-based ELISA就是雙通道cell-based ELISA，原理略：（需要熒光檢測(cè)方式和相應(yīng)儀器）；

 

單通道cell-based ELISA，即一次只能檢測(cè)一種目的蛋白，他和普通ELISA的主要區(qū)別在于樣品處理過(guò)程：

 

事實(shí)上，根據(jù)單通道的cell based elisa 原理，可以自己建立cell based elisa 實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)；

細(xì)胞加入培養(yǎng)板中；

加入刺激物或者抑制劑進(jìn)行培養(yǎng)；

對(duì)細(xì)胞進(jìn)行固定或者封閉；

加入第一抗體；

加入HRP 結(jié)合的二抗（二抗的選擇，同western blot）；

加入底物進(jìn)行顯色。