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ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采集、處理和保存

瀏覽次數(shù):1416 發(fā)布日期:2014-9-1  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采集、處理和保存
 
能夠應(yīng)用ELISA 實(shí)驗(yàn)的樣本種類很多,有血清,血漿,細(xì)胞上清,細(xì)胞裂解液,尿液,關(guān)節(jié)滑液,腦脊液,肺泡灌洗液,各種組織的組織勻漿;采集和處理的方式都不相同。下面就列出了BioTNT 收集的給類樣本的采集、處理和保存方式。方法大多出自文獻(xiàn)和試劑盒說明書,部分方法經(jīng)BioTNT 驗(yàn)證過,但有的方法并沒有實(shí)際操作過,所以,以下方法僅供參考。
 

一、ELISA實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存;

1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中;

2、 采血后室溫靜置1小時(shí);

3、 采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。

4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/SPAN>

2-8℃下,可放置保存24-48小時(shí)

-20下,可放置保存1個(gè)月;

-70下,可放置保存6個(gè)月;

5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測定。

大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的 ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染,因?yàn)榫w中可能含有含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮 時(shí)檢測。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。

 

二、ELISA實(shí)驗(yàn)中血漿的采集、處理和保存;

1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中;

2、 按1:9加入抗凝劑(EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉),30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集;

3、 采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心5min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。

4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/SPAN>

2-8℃下,可放置保存24-48小時(shí);

-20下,可放置保存1個(gè)月;

-70下,可放置保存6個(gè)月;

5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測定。 請注意指標(biāo)說明書上對于抗凝血?jiǎng)┦欠裼刑厥庖螅?/SPAN>建議使用EDTA。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。

注意事項(xiàng):制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑EDTA,抗凝不完全的標(biāo)本因纖維蛋白原干擾而造成假陽性。

 

三、ELISA 實(shí)驗(yàn)中尿液的采集、處理和保存;

1、 采集尿液樣本500ul,加入無菌試管中;

2、 采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的樣本留上清棄下面沉淀。

3、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/SPAN>

2-8℃下,可放置保存24-48小時(shí)

-20下,可放置保存1個(gè)月;

-70下,可放置保存6個(gè)月;

4、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測定。

 

、ELISA 實(shí)驗(yàn)中腦脊液的采集、處理和保存;

1、采集腦脊液樣本,加入無菌試管中;

2、采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的樣本留上清棄下面沉淀。

3、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/SPAN>

2-8℃下,可放置保存24-48小時(shí);

-20下,可放置保存1個(gè)月;

-70下,可放置保存6個(gè)月;

4、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測定。

 

、ELISA 實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞上清液的采集、處理和保存;

1、采集細(xì)胞培養(yǎng)上清液500ul,加入無菌試管中;

2、采集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清

來源:BioTNT(冠泰生物)
聯(lián)系電話:021-51692391
E-mail:sales@biotnt.com

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