Union BioMetrica COPAS 大顆粒流式系統(tǒng)應(yīng)用
C13C4.5/Spinster,一種進(jìn)化上保守的蛋白作用于脂肪代謝而對線蟲生育能力做出調(diào)控 | ||
C13C4.5/Spinster, an evolutionarily conserved protein that regulates fertility inC. elegans through a lysosome-mediated lipid metabolism process | ||
Mei Han, Hao Chang, Peng Zhang, Tao Chen, Yanhua Zhao, Yongdeng Zhang, Pingsheng Liu, Tao Xu, Pingyong Xu | ||
Protein & Cell May 2013,Volume 4,Issue 5,pp 364-372 | ||
中科院生物物理所徐濤教授團(tuán)隊采用Union BioMetrica COPAS 大顆粒流式系統(tǒng)于本年在國際知名刊物 “蛋白與細(xì)胞” 中發(fā)表——C13C4.5/Spinster,一種進(jìn)化上保守的蛋白作用于脂肪代謝而對線蟲生育能力做出調(diào)控。(Protein & Cell, May 2013,Volume 4,Issue 5,pp 364-372)。 | ||
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脂滴在幾乎所有的物種都存在的細(xì)胞器,它的主要作用是儲存中性脂肪。了解脂滴的調(diào)控中模式,將有利于解決肥胖和其他脂肪相關(guān)疾病。在本研究,研究員選擇了11種可能跟線蟲 (Caenorhabditis elegans.) 脂質(zhì)代謝相關(guān)的候選RNAi控制序列。使用Union BioMetrica COPAS 大顆粒流式細(xì)胞儀,配備BODIPY 493/503 激光進(jìn)行分析, 研究員發(fā)現(xiàn)其中有6個候選序列對脂肪儲存負(fù)向控制,有3個候選對脂肪儲存是正向控制。研究員選擇了其中一個負(fù)調(diào)節(jié)RNAi C13C4.5作為后續(xù)研究。 |
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原文 | ||
C13C4.5主要表達(dá)于線蟲腸道。研究員發(fā)現(xiàn),C13C4.5是維持脂滴代謝的重要基因。生化分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),在敲除C13C4.5基因的線蟲中,50%的三;视停═AG)丟失。受激拉曼散射(SRS)信號顯示C13C4.5突變型與野生型相比,突變型49.6%的脂肪含量在腸道的近端區(qū)域, 而野生型86.3%的脂肪含量在腸道前端區(qū)域。C13C4.5基因敲除線蟲與野生型比較,其脂滴的大小和信號強(qiáng)度平均值顯著下降。LMP-1標(biāo)記的膜結(jié)構(gòu)在C13C4.5突變型線蟲腸道也增大。最后C13C4.5(ok2087) 突變型中也發(fā)現(xiàn)生育缺陷?偠灾,這些結(jié)果表明,C13C4.5可能是通過干擾溶酶體的形態(tài)和功能而調(diào)節(jié)線蟲脂滴脂肪含量和大小,并間接對生育機(jī)能做出調(diào)控。 | ||
模式動物如線蟲,斑馬魚等、模式植物種子、大體積細(xì)胞(干細(xì)胞團(tuán),3D細(xì)胞球隊)及微球的分選在生命科學(xué)研究中有著非常廣泛的應(yīng)用,但是由于這些對象體積太大,普通流式細(xì)胞儀難以對其進(jìn)行分選,而手工鏡下分選耗時耗力、效率低下、準(zhǔn)確性難以保證,Union Biometrica公司出品的COPAS蠕蟲/胚胎流式分選系統(tǒng)/多參數(shù)生物微粒分析與分選系統(tǒng), 是市面上唯一能對大顆粒進(jìn)行分析與分選的流式細(xì)胞儀。 |