【摘要】目的 研究中等負(fù)荷的運動訓(xùn)練對心理應(yīng)激大鼠行為和外周血氧自由基的影響。方法健康的雄性SD大鼠32只,隨機(jī)分為對照組、心理應(yīng)激組、運動組和運動心理應(yīng)激組,實驗后測定大鼠的開場行為以及外周血自由基的變化情況。結(jié)果 ①心理應(yīng)激組、運動組以及運動心理應(yīng)激組(分別為64. 37±16. 90,59. 63±13. 45,54. 88±10. 68)與對照組(43. 25±16. 42)比較數(shù)都有顯著的增加( P<0. 05);伸高次數(shù)(分別為16. 63±5. 09,10. 00±6. 85,17. 00±10. 77)與對照組(23. 88±6. 79)相比較都有所降低,且心理應(yīng)激組和運動組具有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義( P<0. 05) ②心理應(yīng)激組、運動組(分別為78. 13±18. 10和56. 48±19. 21)與對照組(36. 90±4. 19)比較SOD的活性顯著增強(qiáng)( P<0. 05) ,運動心理應(yīng)激組SOD的活性(36. 90±4. 19)降低;而MDA濃度的變化,心理應(yīng)激組(8. 63±3. 18)與對照組(4. 90±1. 58)比較顯著增加( P<0. 01) ,運動組(2. 76±1. 60)顯著降低( P<0. 01) ,運動心理應(yīng)激組下降但差異無顯著性。結(jié)論中等負(fù)荷的運動訓(xùn)練可以通過降低心理應(yīng)激反應(yīng)的強(qiáng)度,拮抗心理應(yīng)激對機(jī)體的損傷。

    【關(guān)鍵詞】中等負(fù)荷運動訓(xùn)練; 心理應(yīng)激; 開場行為測試; SOD; MDA

本研究通過對SD大鼠進(jìn)行中等負(fù)荷強(qiáng)度游泳的訓(xùn)練,并施加大強(qiáng)度的噪音刺激,測定大鼠行為和外周血氧自由基MDA的濃度變化及SOD的活性,以探討心理應(yīng)激、運動訓(xùn)練及其他們交互作用對機(jī)體的影響,為進(jìn)一步研究運動訓(xùn)練作為一種減輕心理應(yīng)激應(yīng)對方式提供理論依據(jù)。材料與方法

一、實驗動物及喂養(yǎng)

健康的雄性SD大鼠32只(購自中國科學(xué)院上海動物研究中心),隨機(jī)分為4組,即對照組、心理應(yīng)激組、運動組、運動心理應(yīng)激組,每組8只。分籠飼養(yǎng),每籠4只,飼養(yǎng)選擇塑料制品,并配有不銹鋼罩、塑料吸水瓶和鋁吸水管,飼養(yǎng)溫度15～16℃,國家標(biāo)準(zhǔn)固體混合飼料喂養(yǎng),自由進(jìn)食。

二、實驗方法

(1)運動條件:玻璃鋼游泳池, (150cm×60cm×70cm),水深60cm,超過大鼠身長2倍,水溫31～32℃。(2)運動方式:無負(fù)重游泳,每天1次,每次60min,每周6次。(3)心理應(yīng)激模型:將大鼠每天定時進(jìn)入實驗區(qū)給予噪音刺激,刺激強(qiáng)度為105dB,噪音為不間斷的“嗚嗚”聲, 1次/d,每次2h,持續(xù)3周。實驗區(qū)與飼養(yǎng)區(qū)在溫度,光照條件保持一致。(4)分組和訓(xùn)練方案:對照組:平時不運動,飼養(yǎng)條件與訓(xùn)練組相同;心理應(yīng)激組:前7周與對照組相同,從第8周起將大鼠每天定時進(jìn)入實驗區(qū)給予噪音刺激,刺激強(qiáng)度為105dB,噪音為不間斷的“嗚嗚”聲, 1次/d,每次2h,持續(xù)3周。運動組:前3d適應(yīng)性游泳30min,然后每天游泳1次,每次60min,共10周。運動心理應(yīng)激組:前7周與運動組相同,從第8周起,再同時附加105dB噪音刺激,心理刺激與運動分別在下午和晚上進(jìn)行,應(yīng)激方式和應(yīng)激組相同。

    三、開場行為測定

末次心理應(yīng)激前24h,將動物置于高40cm、直徑80cm、周壁為黑色、底面被分成面積相等的25塊組成的曠場里。實驗室內(nèi)隔音,光照度約60Lx。觀察3min SD大鼠的行為,以穿越底面的塊數(shù)為水平爬格活動得分,以兩腳離地伸高的次數(shù)為站立性行為的得分。

    四、SOD活性和MDA含量的測試

1.取材:大鼠噪音末次應(yīng)激后24h,依次麻醉,從腹腔主動脈處各取血2ml,分別置于2個玻璃試管中,用于測定SOD、MDA的含量。

2. 測定方法: SOD活性采用黃嘌呤氧化酶法測定,MDA采用TBA縮合比色法測定, SOD和MDA試劑盒購自南京建成生物工程技術(shù)有限公司;組織勻漿液蛋白定量采用考馬氏亮藍(lán)法。測定儀器: 7522紫外分光光度計。

    五、結(jié)果處理

所有數(shù)據(jù)由SPSS軟件分析處理,采用獨立樣本t檢驗、具有交互作用的雙因素方差分析。

結(jié) 果

一、中等負(fù)荷運動訓(xùn)練對心理應(yīng)激大鼠開場行為的影響，結(jié)果顯示,心理應(yīng)激組、運動組以及運動心理應(yīng)激組與對照組進(jìn)行比較, SD大鼠爬格次數(shù)都有顯著的增加( P<0. 05)。

二、中等負(fù)荷運動訓(xùn)練對心理應(yīng)激大鼠氧自由基的影響就SOD活性而言,心理應(yīng)激組、

運動組以及運動心理應(yīng)激組與對照組進(jìn)行比較,心理應(yīng)激組、運動組SOD的活性顯著增強(qiáng),且運動心理應(yīng)激組SOD的活性降低。

    討 論

開場反應(yīng)(openfield)又稱戶外情景反應(yīng),現(xiàn)在已經(jīng)作為研究動物恐懼、緊張情緒的重要指標(biāo)。目前心理應(yīng)激對開場行為的研究結(jié)果存在分歧,一些研究支持動物因心理應(yīng)激而產(chǎn)生緊張、恐懼(情緒性)時會發(fā)生爬格減少,僵硬、自立活動減少等現(xiàn)象,也有結(jié)果支持動物因心理應(yīng)激而產(chǎn)生爬格次數(shù)增加、探究活動增強(qiáng)等現(xiàn)象。本實驗研究表明,心理應(yīng)激組SD大鼠曠場中的爬格數(shù)增加,伸高次數(shù)顯著減少,說明心理應(yīng)激對大鼠行為產(chǎn)生明顯影響。目前已有許多的研究表明,通過誘發(fā)的自由基反應(yīng)可以對腦、肝以及心臟等組織造成損傷。測試

MDA的量可以反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度,間接地反映細(xì)胞損傷的程度,而SOD活力的高低間接反映機(jī)體清除氧自由基的能力,通過SOD與MDA的結(jié)果分析,對于疾病的病因?qū)W探討,治療有著重要的意義。實驗結(jié)果表明,心理應(yīng)激組血液中MDA的濃度顯著增加,運動組MDA的濃度顯著降低。通過分析運動心理應(yīng)激組的含量大于運動組而小于心理應(yīng)激組結(jié)果可以知

道,運動與噪音刺激對大鼠血液MDA的濃度變化有交互作用,中等負(fù)荷運動訓(xùn)練可能是通過降低噪音刺激產(chǎn)生MDA的濃度,拮抗噪音應(yīng)激對機(jī)體造成的損傷。對SOD活力的測定結(jié)果表明,心理應(yīng)激組和運動組的活力都有顯著的提高;中等負(fù)荷運動訓(xùn)練能提高SOD的活力,這已經(jīng)被許多的研究證明,而已有一些研究支持心理應(yīng)激后SOD的活力下降,這可能因為高

等動物細(xì)胞內(nèi)只有兩種SOD即銅鋅2SOD(CuZn2SOD)與錳2SOD(Mn2SOD), 二者相加等于總的SOD(T2SOD),而兩者在應(yīng)激時誘導(dǎo)需要的閾值和時相上有差異,這就造成不同實驗設(shè)計和測量方法存在不同結(jié)果的必然。同時通過雙因素分析可知,中等負(fù)荷運動訓(xùn)練與心理應(yīng)激對外周血SOD活力有顯著的交互作用。