摘 要 目的:探討中醫(yī)藥提高運動成績、減輕過度訓練引致的機體免疫力下降的作用機制。方法:50只大鼠隨機分成3組,進行相應的跑臺訓練和測試。結(jié)果:大強度訓練大鼠脾細胞抗體形成能力下降、白細胞移動抑制指數(shù)升高,且其血漿ACTH和β-EP的含量低于非訓練對照組動物。而進行大強度訓練的同時服用復方紅景天的中藥組動物的上述指標均有改善趨勢。結(jié)論:復方紅景天能提高大強度運動大鼠的運動能力及改善其免疫功能的作用可能是通過影響神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡實現(xiàn)的。
The regulation of Rhodiola Crenulata Compound on immune function of rats trained by heavy exercise
SHI Jian-Rong,ZHUANG Jian-Qing,GUO Rui-Xin et al. Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai 200032
Abstract Objective:In order to study the effect of TCM on decreased immune function of the body after heavy exercise(HE) training.Methods:50 rats were divided into three groups in the experiment.Results:A decline in the ability of antibody forming of spleen cells and an increase of the inhibitor moving index of white cells were observed in the rats after heavy exercise training. Meanwhile the contents of ACTH and β-EP in the plasma of the HE rats were lower than that of the normal control.In the group of TCM+HE,the rats were received Rhodiola Crenulata Compound and forced heavy exercise,the above index were improved.This results indicated that this compound was effective in the exercise performance and could enhance immune function of the HE training rats.Conclusion:The effects of the neuroendocrine-immune regulatory circuit were believed to be the possible mechanism for explaining the effect of this compound on promoting the immune function on the rats with heavy exercise training.
Key words Heavy exercise training Immune function Neuroendocrine-immune Rhodiola Crenulata Compound
適度的運動可增強機體免疫力,而過度或激烈運動則會降低機體免疫力。對運動員來說,平時大強度的訓練和賽期激烈的比賽又是不可避免的,故常發(fā)現(xiàn)一些運動員在訓練比賽后,機體抵抗力下降,容易感染疾病,以致影響他們的運動能力,甚至停止參加比賽[1]。因此,如何減輕過度訓練引致的機體免疫力下降、提高運動成績成了研究熱點。中醫(yī)藥為研究解決上述問題提供了新的途徑。本課題觀察了大鼠大強度訓練模型的免疫功能變化及中藥復方紅景天對該模型大鼠免疫功能的影響,并探討其可能的作用機制。
1 材料與方法
1.1 復方紅景天煎劑的制備 將紅景天、黃芪、白術、麥冬等(由上海市藥材公司提供)中藥按比例配好,溫浸2 h后水煎,濃縮為1.78 g生藥/ml。
1.2 動物分組及給藥 將50只體重190 g左右(3月齡)純種SD雄性大鼠(由上海醫(yī)科大學實驗動物中心提供)進行跑臺適應性訓練,剔除不會跑、不愿跑的,篩選出37只大鼠,隨機分成3組:非訓練對照(Normal control)組,7只動物,大強度訓練(Heavy exercise,HE)組,15只動物,中藥(TCM+HE)組,15只動物。中藥組通過灌胃給藥,給藥量為10 ml/kg體重,每日分2次灌胃。非訓練對照組與大強度訓練組動物以水代藥,每天亦灌胃2次。根據(jù)量效關系的預測實驗,中藥的最佳用量相當于臨床成人用量的25倍。
1.3 跑臺訓練方法 非訓練對照組動物自由生活在籠內(nèi),不施加運動負荷。大強度訓練組及中藥組大鼠用國產(chǎn)電動鼠類跑臺進行訓練[2],每周訓練6 d。第1周以15 m/min的速度,每天訓練10 min;第2周跑速為20 m/min,跑時從每日10 min起增至每日60 min;第3周前3日速度為30 m/min,時間為60 min,后3日跑速不變,跑時每日增加10 min,從70 min/d增至90 min/d;第4周至第8周,均以30 m/min的速度訓練90 min。訓練過程中,由于動物腳傷或不明原因的不愿跑,又淘汰9例,到第8周結(jié)束時,大強度訓練組為10只大鼠,中藥組為11只大鼠。
1.4 跑步成績測試 第8周的第1天,大強度訓練組和中藥組大鼠在固定速度為40 m/min的情況下跑步,以大鼠竭盡全力所能持續(xù)的最長跑時作為跑步成績。
1.5 取樣及測試方法 8 w結(jié)束后,大強度訓練組和中藥組大鼠在最后一次訓練停止后20 h左右,用戊巴比妥麻醉,在上午完成取血及有關組織材料的取樣。溶血空斑試驗(PFC)用小室液相法測定抗體形成細胞,白細胞移動抑制試驗用毛細管法測定移
動抑制指數(shù)(IMI),血漿ACTH及β-EP分別由上海市內(nèi)分泌研究所、第二軍醫(yī)大學神經(jīng)生物學教研室檢測。
2 結(jié)果
2.1 大強度訓練組與中藥組(TCM+HE)跑步成績比較 見表1。
2.2 3組大鼠白細胞移動抑制指數(shù)、溶血空斑試驗及血漿ACTH、β-EP的含量 見表2。
表1 大強度訓練組與中藥組跑步成績比較(min)
Tab.1 The comparison of running time between the HE group and the TCM+HE group(min)
Couple of rats |
Running time |
HE |
Difference |
TCM+HE | |||
1 |
469.6 |
321.8 |
147.8 |
2 |
330.7 |
139.5 |
191.2 |
3 |
340.0 |
159.0 |
181.0 |
4 |
299.4 |
164.3 |
135.1 |
5 |
186.2 |
135.3 |
50.9 |
6 |
164.7 |
125.0 |
39.7 |
7 |
174.9 |
186.5 |
-11.6 |
8 |
278.5 |
380.8 |
-102.3 |
9 |
270.9 |
213.9 |
57.0 |
10 |
136.4 |
64.2 |
72.2 |
note:t test,P<0.05,the mean:HE 189.03±95.20,TCM+HE 254.48±103.25
表2 3組大鼠白細胞移動抑制指數(shù)、溶血空斑試驗及血漿ACTH、β-EP的含量(±s)
Tab.2 The results of IMI,PFC and the plasma contents of ACTH and β-EP in the three group animals (±s)
Group |
IMI |
PFC(/106 spleen cells) |
ACTH (pg/ml) |
β-EP(pg/ml) |
Normal control |
0.764±0.0658 |
4.95±1.56 |
90.24±40.23 |
333.58±105.90 |
HE |
1.089±0.11811) |
3.54±0.801) |
54.69±21.831) |
212.42±81.811) |
TCM+HE |
0.739±0.519 02) |
4.11±1.342) |
65.02±41.072) |
304.33±129.772) |
note:F test,1)compared with the normal control group P<0.05,2)compared with the normal control group P>0.05
3 討論
機體免疫細胞存在不同遞質(zhì)和激素受體,接受神經(jīng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的調(diào)節(jié);另外,免疫細胞也分泌不同遞質(zhì)、激素和細胞因子對神經(jīng)、內(nèi)分泌以及免疫系統(tǒng)本身實現(xiàn)反饋性調(diào)節(jié),形成神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡。在生理活動情況下維持機體正常免疫功能。其作用是極其復雜的,如生長激素對免疫功能具有廣泛的加強作用,而腎上腺糖皮質(zhì)激素具有廣泛的抑制作用,ACTH及β-EP則表現(xiàn)為對免疫的雙重調(diào)節(jié)作用[3]。
運動對免疫功能的影響與運動強度、訓練時間有關:長期適度或輕度及中度慢性運動對免疫系統(tǒng)的影響,可能是機體對運動應激的生理性反應。而急性激烈運動和長期激烈的訓練促進體內(nèi)具有免疫抑制作用的激素的釋放,抑制了機體免疫功能。小鼠經(jīng)過5 w較大強度游泳訓練后,CD4+/CD8+細胞比值降低,T抑制細胞因子產(chǎn)生增加,脾細胞對外源性IL-2的反應能力降低,對TD抗原的二次抗體應答受抑制,抗體產(chǎn)生水平較對照組明顯降低,這些結(jié)果表明大強度訓練可引起免疫抑制[4]。
本實驗用大鼠跑臺運動模擬田徑運動中周期性耐力項目的反復超長距離跑步,造成大鼠大強度運動模型[2,5]。觀察到大強度訓練組動物第8周時體重(345.90±23.75 g)明顯低于非訓練對照組(392.29±54.68 g,P<0.05),跑步持續(xù)時間的測試成績低于中藥組,PFC和IMI實驗結(jié)果均表明該組動物的體液免疫和細胞免疫水平下降,血漿中ACTH和β-EP含量均低于非訓練對照組。一般情況下,大運動量后即刻測定機體血漿ACTH是升高的,本工作中所測得的ACTH的下降可能與大強度訓練及取樣時間有關(實驗動物在末次運動20 h后取樣)。
目前認為ACTH和β-EP是一種免疫系統(tǒng)內(nèi)源性調(diào)節(jié)的重要調(diào)質(zhì),二者的變化常相伴出現(xiàn)、明顯相關。不少作者認為大強度運動引起β-EP增加[6],也有報道運動后β-EP下降[7,8],Vires認為這些不同結(jié)果與訓練強度的不一致、實驗取樣前一天的運動量以及機體的休息情況有關。此外,不同實驗者在體外的關于ACTH和β-EP的免疫功能調(diào)節(jié)作用觀察結(jié)果有時呈相反或雙重作用,其機理尚不完全清楚[9]。
中醫(yī)的重要理論如正邪學說、陰陽學說和臟象學說中的某些論述與免疫學的一些基本概念有類同之處。多年的臨床實踐證明,補腎法能改善機體的免疫狀態(tài),健脾補氣、補肺益氣方藥等都具有提高機體免疫功能的作用。中藥所引起的免疫功能變化,不僅是作用于免疫系統(tǒng)的結(jié)果,還可能是通過神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡所表現(xiàn)出來的總效應[10]。
根據(jù)文獻報道和我們的調(diào)研結(jié)果:長期大強度訓練的運動員以氣陰兩虛為主。故本實驗中用抗疲勞、耐缺氧的具有適應原樣作用的紅景天為主藥,并且輔以補氣升陽健脾益氣的黃芪、白術以及養(yǎng)陰生津的麥冬等,以改善大強度訓練大鼠機體的功能,提高運動能力。其中的黃芪,它不僅能增強免疫功能,還有雙向調(diào)節(jié)作用,可以認為是一種免疫調(diào)節(jié)劑。黃芪具有增強和調(diào)節(jié)機體免疫功能、提高機體抗病能力的作用是較肯定的事實。我們曾比較復方紅景天與單方的作用,實驗結(jié)果顯示復方提高小鼠運動能力的作用超過單方,說明復方加強益氣養(yǎng)陰的作用,能更好調(diào)節(jié)長期大強度訓練的機體功能,在大鼠進行大強度訓練的同時服用中藥后運動成績提高;細胞和體液免疫功能以及血漿ACTH和β-EP水平與正常對照動物無顯著性差異,說明有接近正常組動物的趨勢,推測可能與該中藥調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌功能紊亂的作用有關。作者簡介:施建蓉,女,35歲,碩士,副研究員,主要從事中西醫(yī)結(jié)合基礎研究;
莊劍青,女,47歲,碩士,副研究員,主要從事中西醫(yī)結(jié)合基礎研究
4 參考文獻
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