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                                                              English | 中文版 | 手機版 企業(yè)登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
                                                              當(dāng)前位置 > 首頁 > 技術(shù)文章 > ELISA(雙抗體夾心法)—檢測HBsAg

                                                              ELISA(雙抗體夾心法)—檢測HBsAg

                                                              瀏覽次數(shù):2522 發(fā)布日期:2009-11-30 
                                                              以已知抗體(抗HBs)包被載體,然后將含有抗原的待檢標(biāo)本加入,共同孵育后,抗原結(jié)合于包被抗體上,再加入酶標(biāo)記特異抗體(酶標(biāo)抗HBs),酶標(biāo)抗體連接到抗原上,最后加入底物溶液,根據(jù)顏色反應(yīng)來判定抗原含量。

                                                              【材料】HBsAg試劑盒,本試劑盒含:

                                                              1、包被抗-HBs反應(yīng)條

                                                              1

                                                              2、酶結(jié)合物

                                                              1

                                                              3、HBsAg陽性對照

                                                              1

                                                              4、HBsAg陰性對照

                                                              1

                                                              5、洗滌液:用前每瓶作120稀釋

                                                              1

                                                              6、顯色劑(TMBA

                                                              1

                                                              7、顯色劑(TMBB

                                                              1

                                                              8、終止液

                                                              1

                                                              【方法】
                                                              1、加入待測標(biāo)本每孔0.05ml,并設(shè)HBsAg陽性對照2孔,HBsAg陰性對照2孔,空白對照1孔,然后加入酶結(jié)合物每孔1滴(0.05ml、空白對照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
                                                              2、洗板:棄去反應(yīng)條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔,棄去拍干,反復(fù)五次后拍干。
                                                              3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鐘。
                                                              4、每孔加終止液1滴(0.05ml),混勻。
                                                              【結(jié)果】
                                                              比色法:波長450nm,先用空白孔校零點,然后讀取各孔光密度值。
                                                              樣品OD值/陰性對照平均OD值≥ 2.1判斷為陽性,否則為陰性。
                                                              備注:陰性對照平均OD值低于0.05作0.05計算,高于0.05按實際OD值計算。陽性對照OD值≥0.8,實驗結(jié)果有效。
                                                              【注意事項】
                                                              1、試劑盒置2℃~8℃保存。
                                                              2、使用前試劑應(yīng)搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加。
                                                              3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測標(biāo)本所需微孔條,置室溫平衡30分鐘后再行測試,余者應(yīng)及時封存于冰箱中以備后用。
                                                              4、待測標(biāo)本不可用NaN3防腐。
                                                              5、不同批號試劑請勿通用。
                                                              6、結(jié)果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。
                                                              7、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶時,請置37℃至溶解。
                                                              來源:上海科興生物科技有限公司
                                                              聯(lián)系電話:021-60510070,60541896
                                                              E-mail:[email protected]

                                                              標(biāo)簽: 檢測HBsAg
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