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SNP位點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)
基于雜交原理
服務(wù)類別:分子與細(xì)胞總訪問(wèn):2825
最后更新:2024-11-27半年訪問(wèn):21
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 SNP
單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),即指由于單個(gè)核苷酸堿基的改變而導(dǎo)致的核苷酸序列的多態(tài)性。

SNP檢測(cè)
主要是指在基因組水平上由單個(gè)核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性檢測(cè)。與其他分子標(biāo)記相比,SNP分辨率最高也最為豐富,覆蓋基因組范圍大,遺傳上比較穩(wěn)定,在人類基因組中,估計(jì)平均每1000個(gè)堿基對(duì)就有1個(gè)SNP,估計(jì)其總數(shù)可達(dá)300萬(wàn)個(gè)甚至更多,是繼微衛(wèi)星之后的第三代遺傳標(biāo)記。

技術(shù)原理

對(duì)一個(gè)SNP位點(diǎn)設(shè)計(jì)兩條探針,一條檢測(cè)野生型位點(diǎn),一條檢測(cè)突變位點(diǎn),每條探針從突變位點(diǎn)處分成左右兩個(gè)區(qū)段。兩條探針的左區(qū)段序列相同,右區(qū)段有兩點(diǎn) 不同,一是SNP位點(diǎn),二是探針本身長(zhǎng)度不同。檢測(cè)野生型位點(diǎn)的探針含有與該位點(diǎn)完全匹配的堿基,檢測(cè)突變型位點(diǎn)的探針含有與突變位點(diǎn)完全匹配的堿基。一 般檢測(cè)突變型位點(diǎn)的探針比野生型長(zhǎng)。如果同時(shí)檢測(cè)多個(gè)位點(diǎn)就設(shè)計(jì)多對(duì)探針。

樣品要求
 DNA樣品 待檢測(cè)DNA樣品濃度要相對(duì)均一,DNA樣品濃度在10 ng/µl-50 ng/µl之間,體積>20μl,用雙蒸水或者TE緩沖液溶解,不含PCR抑制劑。務(wù)必注明樣品的準(zhǔn)確濃度。
客戶提供資料
詳細(xì)的SNP檢測(cè)位點(diǎn)及上下游各200個(gè)堿基的基因組DNA模板序,并注明在此范圍內(nèi)之所有其它SNP位點(diǎn)。

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