單克隆抗體:
1.概念:由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。
2.特點(diǎn):化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng),靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運(yùn)用藥物與單克隆抗體連接在一起制成“生物導(dǎo)彈”
(3)分離和純化抗原分子。
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體;蛘,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
小鼠抗TRIB3單克隆抗體說明書單抗制備過程:
1.提取合成專一性抗體的單個(gè)B淋巴細(xì)胞(不能在體外生長)。
2.應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。
3.對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),選出所需要的細(xì)胞群,并進(jìn)行克隆化培養(yǎng),得到穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。
4.提純,一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。
多抗和單抗特性比較:
(1)均一性。一種單抗中,每個(gè)抗體的化學(xué)結(jié)構(gòu)和氨基酸順序都相同,只有一種Ig亞類。多抗小鼠抗TRIB3單克隆抗體說明書是多種種類和亞類Ig的混合物。
(2)穩(wěn)定性。單抗對PH變化敏感,對熱不穩(wěn)定,提純過程中易變性,而多抗的穩(wěn)定性則較好。
(3)特異性。單抗是單一地針對抗原的某一決定簇,所以用它進(jìn)行血清學(xué)反應(yīng)時(shí),特異性強(qiáng),敏感性高,一般不發(fā)生交叉反應(yīng)。而多抗能與抗原上的多種抗原決定簇結(jié)合,所以特異性較差,較易引起交叉反應(yīng)。
(4)重復(fù)性。單抗的重復(fù)性好,而多抗每批都不一樣。
(5)沉淀反應(yīng)。多抗由于與抗原多價(jià)結(jié)合容易形成網(wǎng)絡(luò)樣沉淀,而單抗只與抗原結(jié)合產(chǎn)生二聚體,不能直接形成抗原抗體沉淀物。大鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(RPNF)(5×105)麻楓樹酚酮B(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Jatropholone B
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS33β-乙酰氧基-7,25-甘遂二1-24(R)-醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品3β-acetoxy-eupha- 7,25-dien-24(R)-ol
615小鼠前胃癌瘤株;Fc 小鼠腎小管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL11-羥基柳杉酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品11-hydroxy-sugiol
MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 MouseL-乳酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品L-(+)-Lactic acid
CDH16 Others Human 人 CDH16 / Cadherin-16 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 辛伐他汀二聚體雜質(zhì)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Simvastatin Dimer Impurity
615小鼠癌瘤株;Ca763 小鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1-本基-3-吡唑烷酮50U
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 Mouse2,4-二錄酚 2,4-Dichlorophqnol 10-83-
CES2 Others Human 人 CES2 / Carboxylesterase-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DEAE葡聚糖5克
人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA鉍粒5克
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 6361-21-32-錄-5-硝基2-Chloro-5-nitno
FIP293細(xì)胞,人胚腎細(xì)胞(亞系克隆) 貓腎細(xì)胞,F81細(xì)胞 CL-0276H-97(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2AMAC2-基酮5克BR
801-D (人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2酮 Anthrone (ACS,97%) 90-44-8 10G 通用試劑
HBdSMC-c 人類膀胱平滑肌細(xì)胞(HBdSMC) 500,000cells 原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml愈創(chuàng)木酚;鄰羌基本迷 Guciccol;o-xy7noxycnisolq;1-xy7noxy-2-Mqthoxybqnzqnq 1990-2-1
超氧化物歧化酶分析試劑盒SODwo7iumD-glucuronateD-葡糖醛酸鈉2毫克 BR,98%
CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) GuanidineHCl 250g/500g/1kg/5kg Amresco E424
小鼠腦脊神經(jīng)元MN-r鎢粉(200目)(>99.8%,BR)Tungsten powder質(zhì)量規(guī)格:>99.8%,BR
LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鎢酸(>98%,BC)Tungstic (VI) acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]震顫真菌毒素(>98%,BC)Verruculogen from Penicillium verruculosum質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK-52E 胸膜細(xì)胞瘤,SMC-1細(xì)胞 RIN-m細(xì)胞,褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞羊毛脂Wool fat質(zhì)量規(guī)格:BR
Hep-2, 人喉癌細(xì)胞系 Human5-溴-4-氯-3-吲哚基-Β-D-葡萄糖醛酸鈉鹽X-GLUC, sodium salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級