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【背景資料】:HRP(Horseradish Peroxidase,辣根過氧化物酶)是一種分子量達44000的糖蛋白,由無色的酶蛋白和深棕色的鐵卟啉結合而成,通常來源于辣根植物中,是臨床檢驗試劑中的常用酶。辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)比活性高,穩(wěn)定,分子量小,純酶容易制備,所以最常用。HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結合而成的糖蛋 白,糖含量18%。由于其易于提取、價格相對低廉,同時性質穩(wěn)定,耐熱及有機溶劑的作用,與抗原或抗體偶聯(lián)后,活性很少受損失,因此是迄今為止在免疫學中應用最為廣泛的一種標記用酶。HRP的催化底物包括色原底物、化學發(fā)光底物等,其中最常用的色原底物有鄰苯二胺(OPD)、2,2’-吖嗪-(3-乙酰苯 基噻唑磺酸-6)(ABTS)、四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和4-氨基安替比林:苯酚耦聯(lián)底物對等;而化學發(fā)光底物則包括Luminol/增強劑等系統(tǒng)。
【應用類型】:WB(1:10000 - 1:200000)、ELISA(1:5000 - 1:100000) IHC(1:500 - 1:5000)
【反應性】:該兔抗綿羊二抗只與綿羊IgG分子F(ab')2和Fab部分有特異性反應,與綿羊免疫球蛋白(包括IgG、IgM、IgE、IgD、IgA等)的輕鏈也有反應。該二抗與血清內(nèi)非免疫球蛋白以及綿羊IgG的Fc片段無交叉反應;通過血清吸附處理,其與人血清內(nèi)蛋白的交叉反應降到最低,但可能與除此以外其它種屬的免疫球蛋白有交叉反應。
【保存建議】:凍干粉保存在2-8°C,準備用時,根據(jù)指示的體積加入三蒸水,產(chǎn)品在2-8°C條件下,未稀釋的液體保質期為6周,每天準備新鮮的工作液。如果溶解后想延長保存期,加入等體積的甘油(ACS級別或更好的)使終濃度為50%,保存在-20°C。另外也可以在沒有甘油時直接分裝,并冰凍在-70°C或以下,避免反復凍融。保質期為收到貨物后至少1年,合適的保存方式可以延長保質期。
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