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【背景資料】:FITC(Fluorescein Isothiocyanate,異硫氰酸熒光素)純品為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末,易溶于水和酒精溶劑。FITC分子量為389.4,最大吸收光波長為 490~495nm,最大發(fā)射光波長為520~530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。FITC在冷暗干燥處可保存多年,是目前應(yīng)用最廣泛的熒光素。由于 FITC是小分子化合物,每一個抗體可標記幾個FITC分子,IgM通常用小分子的熒光素標記,如FITC、Cy3/5、Texas Red等。然而FITC的最大缺點是淬滅快,因此要和抗淬滅劑一起使用。FITC性質(zhì)穩(wěn)定,能與蛋白質(zhì)結(jié)合,是檢測組織細胞內(nèi)蛋白質(zhì)最常用的熒光探針。它 還能標記抗體,可用于免疫組織化學單染或多重染色。FITC熒光二抗主要優(yōu)點是人眼對黃綠色較為敏感,通常切片標本中的綠色熒光少于紅色。缺點是在光照下 易淬滅,易受自發(fā)熒光影響。
【應(yīng)用類型】:1:50 - 1:200適用于大部分應(yīng)用
【反應(yīng)性】:該兔抗大鼠二抗與只與大鼠IgG分子F(ab')2和Fab部分有特異性反應(yīng),與大鼠免疫球蛋白(包括IgM、IgE、IgD、IgA等)的輕鏈也有反應(yīng)。該二抗與血清內(nèi)非免疫球蛋白以及大鼠IgG的Fc片段無交叉反應(yīng),通過血清吸附處理,其與人血清內(nèi)蛋白(包括免疫球蛋白的交叉反應(yīng)降到最低,但可能與除此以外其它種屬的免疫球蛋白有交叉反應(yīng)。
【保存建議】:凍干粉保存在2-8°C,準備用時,根據(jù)指示的體積加入三蒸水,產(chǎn)品在2-8°C條件下,未稀釋的液體保質(zhì)期為6周,每天準備新鮮的工作液。如果溶解后想延長保存期,加入等體積的甘油(ACS級別或更好的)使終濃度為50%,保存在-20°C。另外也可以在沒有甘油時直接分裝,并冰凍在-70°C或以下,避免反復凍融。保質(zhì)期為收到貨物后至少1年,合適的保存方式可以延長保質(zhì)期。
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