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| 銷售商： 上海雅吉生物科技有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
- 介紹： 基 因 型araD139 Δ (araA-leu)7697 Δ(lac)X74 galK16 galE15(GalS) lambda- e14- mcrA0 relA1 rpsL150(StrR) spoT1 mcrB1 hsdR2簡 要 說 明 MC1061F-菌株來源于E.coli B/r型SB3118菌株，同時也是DH10b及TOP10的母本菌株。MC1061F-化轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化效率極高，可用作實驗室的常規(guī)質(zhì)粒構(gòu)建及噬菌體展示實驗，但缺乏F`因子，不能用于絲狀噬菌體（比如M13）的感染。不含核酸酶endA1突變，體內(nèi)核酸酶含量較高，提取質(zhì)粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液盡量去除核酸酶對質(zhì)粒的污染。此菌株具有鏈霉素抗性。生物生產(chǎn)的MC1061F-感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>2×109 cfu/μg DNA。
- 操 作 說 明
- 1. MC1061F-感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
- 2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
- 3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
- 4. 5000 rpm離心1分鐘收集菌體，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
- 5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15 h。
- 注 意 事 項
- 1. 感受態(tài)細胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
- 2. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)�；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
- 儲存條件： -80℃
- 用途： 克隆感受態(tài)細胞
- 注意：部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息，我司不保證所提供信息的權(quán)威性，僅供客戶參考交流研究之用
試劑盒售后：本公司出售的試劑盒均保質(zhì)保量，質(zhì)量問題均可免費退換，另提供免費代測服務(wù)。
細胞售后：
1. 細胞運輸丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)；
3. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照，未告知的視為產(chǎn)品合格。4-10天內(nèi)出現(xiàn)問題，請?zhí)峁┘毎掌图毎霈F(xiàn)問題的照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟，并跟我公司人員及時溝通判定是否重發(fā)，具體可以參照我官網(wǎng)或者隨貨說明書相關(guān)售后條款。
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