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| 銷售商： 上海雅吉生物科技有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
- 介紹： 基 因 型F- φ80 lacZ∆M15 ∆(lacZYA-argF)U169 recA1 endA1 hsdR17(rk-, mk+) phoA supE44 λ-thi-1 gyrA96 relA1 tonA簡 要 說 明 JM330菌株(即DH5α T1 Phage Resistant)，來源于DH5α菌株。在DH5α大腸桿菌基因組中引入tonA，賦予其抗噬菌體T1,T5的能力，即為JM330。JM330菌株最大的特點是其可以在體內(nèi)特異性降解甲基化質(zhì)粒模板，廣泛應用于各種DNA定點突變試驗中。JM330菌株缺失核酸內(nèi)切酶 (endA1)和重組酶(recA1)，提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量； lacZΔM15的存在使JM330可用于藍、白斑篩選。生物開發(fā)的JM330感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>1×109cfu/μg DNA。
- 操 作 說 明
- 1. JM330感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（例如：Dpn I消化產(chǎn)物等）并用手撥打EP管底混勻，冰中靜置25分鐘。
- 2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
- 3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇70分鐘。
- 4. 5000 rpm離心1分鐘收集菌體，留取50 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的LB培養(yǎng)基上。
- 5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱至少15小時。
- 注 意 事 項
- 1. 感受態(tài)細胞最好在冰中緩慢融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
- 2. JM330可以對未被Dpn I降 解掉的質(zhì)粒模板進行進一步的降解，因此可以保證定點突變具有更高的陽性率。
- 3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)�；駾pn I消化產(chǎn)物可相應減少最終用于涂板的菌量。
- 儲存條件： -80℃
- 用途： 克隆感受態(tài)細胞
- 注意：部分產(chǎn)品我司僅能提供部分信息，我司不保證所提供信息的權(quán)威性，僅供客戶參考交流研究之用
試劑盒售后：本公司出售的試劑盒均保質(zhì)保量，質(zhì)量問題均可免費退換，另提供免費代測服務。
細胞售后：
1. 細胞運輸丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā)；
3. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照，未告知的視為產(chǎn)品合格。4-10天內(nèi)出現(xiàn)問題，請?zhí)峁┘毎掌图毎霈F(xiàn)問題的照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟，并跟我公司人員及時溝通判定是否重發(fā)，具體可以參照我官網(wǎng)或者隨貨說明書相關(guān)售后條款。
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手機版：JM330 感受態(tài)細胞
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